背景:肝细胞癌(HCC)是全球第二大癌症死亡原因。全球每年约有100万例肝癌病例,为了提高肝癌患者的生存率,研究控制转移的基因以及识别新的预后标志物和治疗靶点十分重要。Abi3(也被称为NESH)是Abi家族三个成员,具有Src同源3(SH3)结构域,脯氨酸富集区(PR),无催化区域,作为一种信号蛋白,目前的研究表明Abi3很可能是抑制细胞运动和转移的抑制因子。p21激活激酶(PAK)家族作为小GTPase Cdc42和Rac的下游效应器,在细胞骨架重组、生存、运动性和肿瘤发生中起关键作用,PAK4与癌症的进展和转移密切相关,可能成为癌症的预测标志物和治疗靶点。本研究以HCC作为Abi3的研究模型,阐明由PAK4介导的Abi3在HCC增殖、迁移和侵袭中的潜在作用和下游通路。我们的研究结果表明,Abi3在HCC进展中发挥作用,是一个潜在的有用的分子预后标志物和治疗靶点。目的:研究Abi3在HCC中的作用;研究PAK4与Abi3间的作用方式;研究PAK4与Abi3间的调控对HCC侵袭转移的影响。方法:选取合适的HCC细胞株稳定下调Abi3,利用细胞功能实验研究Abi3丢失对HCC的影响。利用免疫共沉淀反应,确定Abi3与PAK4的相互作用,根据Abi3的结构域构建Abi3的不同截短载体,利用免疫共沉淀确定二者相互作用的区域。确定PAK4对Abi3的调节作用,选取合适的HCC细胞株稳定上调Abi3,检测上调Abi3对Abi3的作用,以及对细胞HCC细胞株侵袭转移的影响。结果:稳定下调Hep3B细胞中的Abi3能够增加细胞的增值能力,促进细胞非锚定依赖生长,增加细胞迁移及侵袭能力。Abi3的SH3结构域与PAK4能够以非激酶依赖的方式相互作用。PAK4能够抑制Abi3的表达,并且这种作用与PAK4的激酶活性相关。过表达Abi3能够减缓HCC细胞株迁移和侵袭的过程,而PAK4能够翻转这种作用。结论:在HCC细胞株中Abi3丢失能够促进肿瘤增殖、迁移与侵袭。PAK4通过非激酶依赖的方式与Abi3的SH3结构域结合,下调Abi3的表达,促进HCC的迁移与侵袭。