淄博、洛阳两地乙型脑炎病毒检测及病毒性脑炎其它病原筛查

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流行性乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)简称乙脑,是由蚊虫叮咬引起的人类中枢神经系统急性传染病,病死率高,且后遗症严重。乙脑于1951年纳入我国传染病报告系统,是我国法定报告乙类传染病。蚊虫是自然界中主要传播媒介,猪是扩增宿主和传染源。乙脑的病原体为乙型脑炎病毒(简称乙脑病毒),属于黄病毒科黄病毒属病毒。根据流行病学资料可知,山东省淄博市和河南省洛阳市的乙脑报告病例中成年人乙脑发病率和病死率均高。针对这一现象,本课题组于2010年6月至11月对淄博市和洛阳市报告的病毒性脑炎病例开展实验室检测,确定乙脑病例,从而全面掌握淄博、洛阳两地乙脑发病率及其流行病学特征,同时开展了埃可病毒(ECHOV)、柯萨奇病毒(CoxV)、单纯疱疹病毒(HSV)和腮腺炎病毒(MuV)的实验室检测,从而掌握淄博、洛阳两地病毒性脑炎常见病原分布及其流行特点。在实验检测期间,共收集到704例病毒性脑炎病例急性期血清及脑脊液标本,其中淄博市304例(包含305份血清、13份脑脊液标本);洛阳市400例(包含327份血清,119份脑脊液标本),共764份标本。病例涵盖1个月龄婴儿到99岁高龄老人。使用3种方法检测以提高检测准确率:(1)首先采用血清学方法,对764份标本进行乙脑病毒IgM抗体检测,其次对阴性血清标本进行肠道病毒(埃可病毒和柯萨奇病毒)检测,最后对阴性肠道病毒性脑炎病例血清标本进行腮腺炎和单纯疱疹病毒检测。(2)对足量脑脊液标本(淄博市6份、洛阳市119份)和部分血清标本(淄博市68份)进行分子生物学检测、病毒测序、对乙脑病毒核苷酸PrM片段进行系统进化分析;(3)将脑脊液标本(淄博市6份、洛阳市119份)接种BHK-21细胞,培养分离病毒,将分离到的病毒进行血清学、分子生物学鉴定。检测结果显示,淄博市304个病例中病毒抗体和/或核酸阳性的病例共112例,其中埃可和柯萨奇病毒阳性病例最多,共59例(19.4%),依次为乙脑病毒阳性病例30例(9.9%)、腮腺炎病毒15例(4.9%)和单纯疱疹8例(2.6%);洛阳市400个病例中病毒抗体和/或核酸阳性的病例共175例,其中乙脑病毒阳性病例最多,共82例(20.5%),依次为肠道病毒阳性74例(18.5%)、腮腺炎病毒15例(3.8%)和单纯疱疹病毒4例(1.0%);其中5例JEV核酸阳性病例(淄博市2例,洛阳市3例),18例肠道病毒核酸阳性病例(淄博市1例,洛阳市17例);通过JEV核苷酸PrM片段进行基因分析5株JEV都属于基因I型乙脑病毒;病毒分离方法分离出洛阳市2个阳性分离物。从病例年龄分布特征发现,淄博、洛阳两地病毒性脑炎病例都是以15岁以下儿童为主,淄博市占总病例数的82.5%,洛阳市占60.8%。从发病月份统计发现具有季竹特点,淄博市病毒性脑炎病例主要发生在8月,洛阳市病毒性脑炎病例主要发生在8-9月。淄博市乙脑病例集中在9-10月,占总乙脑病例的73.3%,洛阳市集中在8-9月份,占总乙脑病例的96.3%。乙脑实验室检测及其它病原的筛查结果显示,淄博市乙脑发病率0.76/10万,15岁以上成年人占总乙脑病例的90.0%,乙脑病例中40岁以上中老年人占总乙脑病例的83.3%,呈现典型的成年人乙脑流行,并且显示高年龄组为主的单峰流行。洛阳市乙脑发病率1.25/10万,乙脑病例主要分布在1-10岁年龄段(31.7%)和40岁以上年龄段(50%),占总乙脑病例的81.7%,15岁以上乙脑病例占总乙脑病例的63.4%,洛阳市呈现低年龄儿童和成年人乙脑流行,并且成年人乙脑比例具有逐年增加的趋势。本研究通过实验室检测掌握了两地区病毒性脑炎常见病原分布,证实了淄博、洛阳两地存在成人乙脑流行。研究结果对今后的成人乙脑疫苗接种评价提供了科学依据。针对我国部分地区出现的成人乙脑流行这一新的流行病学特点,应引起公共卫生系统重视,建议开展广泛调查,明确地域分布特征;开展成人乙脑发病疾病负担调查,为进一步乙脑防控提供科学的建议。
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