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目的：探究大鼠外周血间充质干细胞（PBMSC）有效的富集方法，并评价其表型特征、生长曲线、集落形成率以及体外培养向中胚层多系分化能力，为PBMSC作为间充质干细胞（MSC）的种子细胞新来源用于治疗难治性组织损伤性疾病提供有价值的实验依据。 方法：①选用4周龄SD大鼠，按100?g/kg/day的剂量每日一次连续5天皮下注射粒细胞集落刺激因子（G-CSF）进行干细胞动员；经左心腔采血，用密度梯度离心法分离出单个核细胞，继而用贴壁培养法得到成纤维样集落生长细胞；细胞培养至第2代，用流式细胞术（CD90、CD44、CD29、CD45、CD11b和CD79a）和免疫细胞化学染色法（CD73、CD105、CD34和HLA-DR）分析分离、培养的PBMSC的表型特征。②MTS检测绘制第2代（P2）PBMSC的生长曲线，并计算细胞倍增时间；采用龙胆紫染色法分析比较 G-CSF动员和未动员的SD大鼠外周血CFU-F的集落形成率（CFE）。③取生长良好的P2代PBMSC，用商品化诱导培养基诱导其向成骨、成软骨以及成脂细胞分化，于诱导21天后，分别采用茜素红、阿利新蓝和油红O染色分析诱导效果。 结果：①外周血单个核细胞原代培养至6～7天可见明显的成纤维样细胞的集落样生长，培养至21天细胞生长汇合度可达80％；传代细胞贴壁能力强，形态均一，呈梭形漩涡状生长。②FCM和免疫组化结果表明，富集的PBMSC高表达CD90、CD44、CD29、CD73及CD105，不表达CD45、CD11b、CD79a、CD34和HLA-DR。③生长曲线显示，传代培养的PBMSC增殖能力强，于培养次日即可进入对数生长期，细胞倍增时间为39.2 h；CFU-F集落形成率的结果表明，动员后的大鼠 PBMSC的集落形成率为(15.67±2.07)/106，而未动员组仅为(0.33±0.58)/106，两者比较差异显著（P﹤0.01）。④PBMSC的中胚层系分化能力诱导培养结果表明，经成骨诱导分化21天后，茜素红染色有明显的钙结节形成；经软骨细胞诱导分化21天后，阿利新蓝染色诱导细胞胞浆内有大量糖胺聚糖形成；经成脂细胞诱导分化21天后，油红O染色显示细胞内有大量脂滴形成。 结论：本实验从大鼠外周血中分离富集到高丰度、高纯度的PBMSC，其具备MSC的表型特征、生长特点和向中胚层多系的分化能力，进一步确证了大鼠PBMSC的存在和应用潜力。