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弱激光一般指激光器输出功率密度在1J/cm~2,输出功率小于50mW,并使组织升温不超过0.1~0.5℃的激光,医学上应用最早、最多的是He-Ne激光,其波长为632.8nm,属可见光范畴(400nm~760nm)。即使最小功率的可见激光,在输出过程中也难免与空气发生碰撞而出现散射现象,在室内停留不久,即可造成眼部的不适感;尤其临床用较高功率的He-Ne激光治疗眼周及眼底疾病,更易造成视网膜的损伤,但并未引起人们足够的重视,He-Ne激光对视网膜不可逆损伤的报道也很少见。所以研究弱激光致眼视网膜的损伤不论在临床还是科研上均有重要意义。 本课题拟从He-Ne激光对大鼠视网膜生物效应出发,研究其致伤的基本特点,探讨谷氨酸受体表达致视网膜光损伤的病理机制,并应用谷氨酸受体拮抗剂:MK-801对损伤机理进行验证,从而为激光损伤的医学防治奠定理论和实践基础。 按随机方法将动物分为正常对照组、损伤组和治疗组,其分别于照后即刻、6h、12h、1d、3d、7d、14d和28d诸时间点进行观察。其中治疗组于照后即刻分别给大鼠肌注MK-801(2mg/kg),损伤对照组肌注相同体积的生理盐水。实验使用中性原子He-Ne激光器对大鼠视网膜造成病理损伤,通过眼底镜、HE染色的观察,原位杂交和免疫组化分别检测NMDAR mRNA及其受体的表达、并用TUNEL染色技术原位检测激光损伤后视细胞的凋亡以及用视觉电生理仪分析治疗前后视网膜的功能等方法,对各组视网膜损伤的结构和功能改变作了系统的研究,结果表明: 1.眼底镜观察发现激光照后大鼠视网膜血管痉挛、局部眼底背景变浅,但没有肉眼可见的明显损伤,如:出血、渗出、坏死等。 2.末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)显示已有大量细胞凋亡产生。 3.HE染色的组织切片在光镜下观察发现视网膜结构随照后时间延长出现规律性变化,病变视网膜全层隆起,内、外核层排列紊乱,核间隙增大等。但治疗组