龙葵素是一种来源广泛的糖苷生物碱,具有抗菌、消炎、杀虫、抗肿瘤等生物学作用,但许多研究表明龙葵素的不合理使用可导致中毒、胚胎发育异常、生精障碍等不良后果。鉴于其疗效和毒副作用,开发和利用龙葵素时须慎重考虑其使用剂量。本研究以人滋养层细胞为材料,研究了龙葵素对HTR-8/SVneo细胞增殖、迁移和浸润的影响,并初步探讨了其作用机制,旨在为龙葵素的合理利用提供理论基础。本研究采用MTS法和iCELLigence细胞功能分析检测了不同浓度的龙葵素对人滋养层细胞HTR-8/SVneo增殖的影响;研究了相对安全浓度的龙葵素对HTR-8/SVneo细胞迁移、浸润、细胞凋亡以及雌二醇分泌的影响,同时也研究了较高浓度龙葵素对细胞的毒性作用,并进一步从基质金属蛋白酶(MMPs)、自噬以及MAPK信号通路探讨了其潜在的分子作用机制。获得了以下研究结果:1.龙葵素浓度为20μM或更低时对HTR-8/SVneo细胞的活性没有显著影响,而当浓度大于30μM时,可显著抑制细胞活性,呈剂量依赖效应。2.当用无毒细胞浓度20μM的龙葵素处理滋养层细胞时,可显著抑制细胞的迁移和侵袭,并促进雌二醇的分泌;同时可促进细胞中自噬相关标志分子Beclin 1、LC3和Atg13的表达,对p62的表达无显著影响;此外,20μM的龙葵素可提高细胞中酶原MMP-2和MMP-9的水平,但对活性形式的MMP-2和MMP-9无显著影响;该浓度处理对细胞内ROS的产生也无显著影响。3.细胞毒性浓度35μM的龙葵素作用滋养层细胞时,同样显著抑制细胞的迁移和浸润,促进雌二醇的分泌和pro-MMP-2和pro-MMP-9表达,所诱导的作用效果与无毒细胞浓度间无显著差异;同时可诱导细胞发生显著的凋亡。因此,高浓度龙葵素对HTR-8/SVneo细胞的毒性作用主要体现在抑制细胞的增殖,同时促进细胞的凋亡。以上结果表明,一定剂量的龙葵素可能通过触发细胞凋亡和自噬,体外抑制人滋养层细胞HTR-8/SVneo的增殖、迁移和浸润,并诱导雌激素的分泌,可能与滋养层的分化有关。