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目的:(1)建立流式细胞术(FCM)检测外周静脉血循环微颗粒(MPs)的实验方法。(2)探讨四种MPs在健康者及胃腺癌患者外周血中表达情况及其临床意义。(3)研究胃腺癌患者手术治疗过程中MPs变化趋势,明确手术治疗对外周血MPs表达水平的影响。探讨急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)患者外周血内皮细胞微颗粒(EMPs)的表达水平及治疗前后变化。方法:(1)FCM检测MPs方法的建立:抽取空腹外周静脉血,以枸橼酸钠抗凝(1:9,含PGE1终浓度为300n M),4℃下3000rpm 15min离心两次,制备乏血小板血浆(PPP),用藻红蛋白(PE)标记的四种特异性荧光抗体(CD61、CD142、CD62e、CD235a单抗),分别标记四种相应微颗粒:血小板微颗粒(PMPs)、组织因子阳性微颗粒(TF-MPs)、EMPs和红细胞微颗粒(RMPs),以1.0 um的标准微球设定前向检测区,大小在0~1.0 um之间、PE标记阳性的微粒为目的微颗粒。(2)健康者及胃腺癌患者MPs表达检测:选取30例健康志愿者及我院收治的85例确诊为“胃腺癌”患者,制备PPP并检测MPs表达。(3)手术对MPs水平的影响:所选取胃腺癌患者分别于术前、术后第1天、术后1周及术后1月抽取空腹外周静脉血,检测四种微颗粒并动态观察其变化,为手术对MPs表达的影响提供一定依据。检测AP患者EMPs表达水平及治疗前后变化。结果:(1)30例健康者PMPs、TF-MPs、EMPs及RMPs表达水平分别为(92.1±65.5/ul)、(37.6±18.6/ul)、(197.2±80.3/ul)和(27.6±12.0/ul),PMPs与EMPs表达量占四种MPs总和的81%。(2)胃腺癌患者PMPs、TF-MPs、EMPs和RMPs表达水平分别为(169.9±81.4/ul)、(65.4±36.7/ul)、(178.06±119.42/ul)、(46.2±32.8/ul),其中PMPs、TF-MPs及RMPs表达水平与健康者对比有统计学差异(P<0.05),EMPs表达在健康者与胃腺癌患者之间无统计学差异(P>0.05)。增高的PMPs、TF-MPs表达水平与胃腺癌TNM分期相关,III期及IV期较I、II期高(P<0.05),TF-MPs还与肿瘤脉管侵犯相关(P<0.05)。(3)胃腺癌患者术后第1天四种MPs表达水平依次为(608.9±407.1/ul)、(135.2±151.8/ul)、(733.5±744.4/ul)、(78.0±73.6/ul),与术前相比有统计学差异(P<0.01),术后MPs表达水平逐渐降低,至术后1月四种MPs表达水平依次为(110.7±90.7/ul)、(42.2±29.5/ul)、(186.9±104.2/ul)、(25.8±13.4/ul),与术前水平相比差异均有统计学意义(P<0.05),四种MPs水平与健康对照组相比无统计学差异(P>0.05)。急性胰腺炎患者EMPs表达水平为(584.0±317.5/ul),较健康者明显增高(P<0.01),炎症治愈后EMPs水平恢复至正常(227.4±105.0/ul),与健康者相较无统计学差异(P>0.05)。结论:(1)采用流式细胞术检测外周血循环中微颗粒的方法具有科学可行性,标准化后的方法具有一定的科研和临床应用价值。(2)胃腺癌患者外周血中PMPs、TF-MPs表达水平与胃腺癌TNM分期相关,Ⅲ期和Ⅳ期患者表达水平均高于Ⅰ期和Ⅱ期;胃腺癌患者TF-MPs高表达水平与肿瘤脉管系统侵犯有关。(3)手术创伤可显著增加胃腺癌患者外周血MPs水平,胃癌根治术可降低胃腺癌患者术前高MPs表达至健康者水平。(4)急性胰腺炎患者EMPs表达水平明显增高,治愈后其表达可恢复至正常水平。