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MicroRNA,简称miRNA,是近几年来分子生物学和遗传学领域的研究热点。miRNA是一类全长约为22个核苷酸的非编码单链小RNA分子,在动植物中均有表达。通常与靶mRNAs的3-非翻译区互补结合,在转录后水平调控基因表达,从而参与调控细胞的增殖、生长、凋亡、应答等生命活动。
MiRNAs表达和代谢的异常还与多种疾病相关。有证据显示miRNA在癌与正常细胞之间的表达存在差异。在乳腺癌、肺癌、肝癌、结直肠癌、宫颈癌等多种人类肿瘤中均发现miRNA的表达变化。miRNA异常表达可通过调节参与癌症相关进程的基因及旁路途径影响肿瘤的进展,提示其可能扮演着类似于抑癌基因或原癌基因的角色。
甲状腺癌是头颈部主要的恶性肿瘤之一,近年来发病率呈现上升趋势,其中甲状腺乳头状癌上升最为显著,大约占80％以上。目前,甲状腺乳头状癌的发病机制还不是十分清楚。因而寻求与甲状腺乳头状癌相关的miRNA分子,阐明其作用机制,有利于甲状腺乳头状癌的诊断。且现已有证据提示miRNAs可作为靶点用于肿瘤的治疗,研究的开展将为甲状腺乳头状癌新型药物的开发提供理论基础。
本课题采用高通量的生物芯片技术筛检甲状腺乳头状癌中异常表达的microRNA。通过norgthern blotting检测及验证芯片发现的甲状腺乳头状癌中microRNA特征性表达谱,同时分析其与甲状腺乳头状癌常见的临床病理特征的联系,探讨microRNA在甲状腺乳头状癌发生发展中可能的作用及其临床意义。这为今后的临床早期诊断及后续的治疗奠定基础。
目的:
探讨甲状腺乳头状癌特征性的microRNA表达谱及其与临床病理特征的相关性。
方法：
采用高通量的生物芯片技术筛检甲状腺乳头状癌中异常表达的microRNA。通过Nortbernblotting方法检测验证13例甲状腺乳头状状癌(癌组织及同侧癌旁正常组织)microRNA的表达,并分析异常表达的microRNA与年龄、性别、肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移、病灶个数等临床病理特征之间的关系。
结果：
1.用基因芯片方法筛检获得的结果显示9例上调的miRNA(miR-375,miR-183,miR-34a,miR-339,miR-146b,miR-203,miR-222,miR-181a,miR-31)及99例下调的miRNA。
2.Northern blotting法检测甲状腺乳头状癌,其结果表明,miR-21,miR-31,miR-34a,miR-221,miR-146b在甲状腺乳头状癌和对应的正常甲状腺组织中的表达有差异,差异有统计学意义(P<0.01)；验证了芯片检测中发现的甲状腺乳头状癌中过表达的microRNA(miR-31,miR-34a,miR-146b)。MiR-21,miR-31,miR-34a,miR-146b,miR-221的表达与甲状腺乳头状癌的年龄、性别、肿块大小、TNM分期、淋巴结转移及病灶个数无关(P>0.05)。
结论：
MiR-21,miR-31,miR-34a,miR-146b,miR-221在甲状腺乳头状癌中表达升高,有望成为甲状腺乳头状癌新的分子标志物。