石油降解菌的筛选及其特性研究

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石油在促进了人类工业发展的同时,石油污染却也让人类付出惨痛代价。石油污染的修复研究工作已经从传统的物理化学法转移到生物修复法,如何获得稳定,高效,经济的降解菌株是目前科学研究的重点。其实,石油烃作为一种混合物,单一的菌株对其降解率有限。如何构建适应性强,降解率高的混合菌株是当前石油污染生物修复工作的关键。本研究以石油为唯一碳源对大庆长期被石油污染的土壤和海鱼肠道中的细菌进行富集培养成功分离到两株石油降解菌qs-1和qs-2。对分离的两个菌株进行了形态学观察,生理生化鉴定以及分子生物学鉴定;考察了碳源、氮源、温度、pH值对菌体生长的影响;利用单因素实验对石油降解条件进行了优化,分别从石油浓度、温度、pH值、装液量、接种量、盐度和添加物等因素进行验证。研究结果表明:菌株qs-1和qs-2经形态观察,生理生化鉴定,分别确定为假单胞菌属Pseudomonas sp和红球菌Rhodococcus qingshengii。菌株qs-2的16srDNA的基因序列,经BLAST对比,与基因登录号为NR043535的Rhodococcus qingshengii相似度达100%。qs-1与qs-2菌株最适碳源为葡萄糖;最适氮源为硝酸铵;最适生长温度为30℃;最佳pH值为7。经单因素实验得到的最佳降解条件为:MgSO4·7H2O0.02%、CaCl20.002%、KH2PO40.1%、K2HPO40.1%、NH4NO30.1%、FeCl30.005%、石油2%、pH7.0、装液量60mL/250mL、接种量12%、盐度2%、温度为30℃降解时间为9天的最佳降解条件下混合菌株的降解率可达49.3%。
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