目的本课题通过用不同剂量的利拉鲁肽对脑缺血再灌注大鼠模型进行干预,观察缺血再灌注后大鼠脑组织炎性因子在不同时间点的表达变化,探讨利拉鲁肽对脑缺血再灌注后炎症反应的影响,为利拉鲁肽在临床应用提供动物实验的研究数据和理论基础。方法选择72只健康的雄性大鼠,体重在180-220g范围内,随机将大鼠分为假手术组,模型组,利拉鲁肽小剂量干预组,利拉鲁肽大剂量干预组。大鼠大脑中动脉闭塞2h后再灌注模型用传统的Lona线栓法制作,于再灌注6h,12h,24h,7d四个时间点应用Zeal Longa神经学评分法分别对大鼠进行评分;大鼠脑梗死灶体积用TTC染色法测定,神经元变性坏死用HE染色法观测,TNF-α,IL-6含量用免疫组织化学法检测,TNF-α,IL-6表达变化用原位杂交法测定。结果神经功能缺损的评分结果:假手术组神经功能缺损评分为0分,其余四组大鼠经神经功能评分评定后,都存在不同程度神经功能缺损(P<0.01)。其中出现神经功能评分损害较严重的是模型组大鼠,利拉鲁肽大,小剂量干预组在12h,24h,7d时间点神经功能缺损评分较模型组降低有显著差异(P<0.05);不同剂量利拉鲁肽干预组大鼠7d这个时间点神经功能缺损评分降低相互比较后亦有显著差异(P<0.05)。通过TTC染色检测大鼠脑梗死体积结果:假手术组的大鼠并无脑梗死出现,其它四组大鼠的脑梗死体积均出现明显增高(P<0.01);利拉鲁肽干预组大鼠与模型组大鼠相比较,利拉鲁肽干预组大鼠24h、7d两个时间点脑梗死体积降低(P<0.05),不同剂量利拉鲁肽干预组大鼠比较,24h、7d两个时间点脑梗死体积降低有显著差异(P<0.05)。HE染色结果:在光镜下观察,大鼠脑缺血再灌注6h后就能见到神经细胞的细胞核固缩,细胞形态的改变,但是神经元周围并未见到明显水肿;而再灌注24h,7d后脑细胞损害效应已经明显增加,光镜下观察,可见大量深染的神经元细胞核固缩、致密,大部分神经细胞结构消失,而且神经元周围水肿明显。通过免疫组织化学检测TNF-α表达结果:各组大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织TNF-α阳性表达明显增高,与假手术组大鼠相比较有显著差异(P<0.01);利拉鲁肽小剂量干预组大鼠与模型组大鼠比较,利拉鲁肽小剂量干预组大鼠在脑缺血再灌注损伤12h、24h两个时间点TNF-α的阳性表达明显降低并有明显差异(P<0.01);与模型组比较利拉鲁肽大剂量组大鼠脑缺血再灌注损伤12h-7d时TNF-α阳性表达明显降低,与模型组比较有明显差异(P<0.01),利拉鲁肽不同剂量组大鼠24h、7d两个时间点TNF-α的阳性表达相互比较有显著差异(P<0.01)。IL-6免疫组化测定结果:各组大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织IL-6阳性表达与假手术组大鼠比较,均有显著差异(P<0.01);利拉鲁肽干预组与模型组比较,利拉鲁肽干预组大鼠,脑缺血再灌注损伤12h、24h,7d三个时间点IL-6的阳性表达明显降低,有显著差异性(P<0.01);应用不同剂量利拉鲁肽组相互比较,大鼠脑缺血再灌注损伤24h、7d两个时间点脑组织IL-6阳性表达亦有明显差异(P<0.01).通过原位杂交的方法检测大鼠脑缺血再灌注损伤后TNF-αmRNA表达结果:利拉鲁肽小剂量组大鼠与模型组比较,小剂量组大鼠脑组织脑缺血再灌注损伤12h、24h,7d三个时间点TNF-αmRNA阳性表达降低,两组比较有明显差异(P<0.01);利拉鲁肽大剂量组与模型组大鼠比较,利拉鲁肽大剂量组大鼠脑缺血再灌注损伤6h,12h,24h、7d四个时间点大鼠脑组织TNF-αmRNA阳性表达明显降低,有显著差异性(P<0.01);与利拉鲁肽小剂量组比较利拉鲁肽大剂量组24h、7d两个时间点TNF-αmRNA阳性表达降低有显著差异(P<0.01)。组内比较在24h时间点,三组阳性表达有明显差异(P<0.01)。通过原位杂交的方法检测大鼠脑缺血再灌注损伤IL-6 mRNA表达结果:利拉鲁肽小剂量组大鼠与模型组相比较,利拉鲁肽小剂量组大鼠在脑缺血再灌注损伤12h,24h,7d三个时间点IL-6 mRNA表达明显降低,两组比较有明显差异性(P<0.01);大剂量利拉鲁肽组与模型组比较,大剂量利拉鲁肽组在大鼠脑缺血再灌注损伤6h、12h、24h,7d四个时间点IL-6 mRNA表达明显降低,两组比较有明显差异(P<0.01);大剂量利拉鲁肽组与小剂量利拉鲁肽组比较,利拉鲁肽大剂量组大鼠脑组织脑缺血再灌注损伤12h、24h,7d三个时间点IL-6 mRNA阳性表达明显降低,两组比较有显著差异(P<0.01),组内比较,三组在大鼠脑缺血再灌注损伤24h时,IL-6 mRNA阳性表达具有显著差异(P<0.01)。结论此研究证明了利拉鲁肽可以对大鼠脑缺血再灌注损伤炎症反应机制发生影响,应用利拉鲁肽干预后,脑缺血大鼠的脑组织TNF-α、IL-6表达在再灌注后各个时间点表达均有所降低,而且神经功能评分改善,脑梗死体积较不干预组降低,且大剂量干预组效果更加显著。并且这些结果都被验证有统计学意义。