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目的:观察慢性乙型肝炎病毒感染产妇新生儿脐血中树突状细胞亚群(DC1和DC2)的变化及其与HBVDNA载量的关系,揭示慢性乙型肝炎宫内感染发生机制,为将来早期阻断儿童慢性乙肝病毒感染提供理论基础。
材料和方法:使用FACS Calibur流式细胞仪及免疫荧光三标记树突状细胞检测试剂盒(购自美国BD公司)对脐血进行树突状细胞亚群的检测。我们采集23名慢性乙型肝炎病毒感染产妇新生儿新鲜脐带血(母为慢性乙型肝炎大三阳患者19人,小三阳患者4人,平均年龄29岁,发现乙肝病史平均11年)。另采集12名正常产妇新生儿脐带血作为对照组。所有产妇经产前检查除外慢性疾病及妊娠合并症。所有标本均在采集后立即用三色分析法进行免疫荧光标记,24小时内上流式细胞仪检测树突状细胞,DC1的特异性标记为Lineagel HLA-DR+CD11C+,DC2的特异性标记为Lineagel HLA-DR+CDl23+。同时对慢性乙型肝炎感染组新生儿脐血分离血清,使用Light Cycler荧光定量PCR检测仪(Roche公司)及HBV核酸扩增荧光定量检测试剂盒(深圳匹基生物工程有限公司)检测HBVDNA载量。
结果:慢性乙型肝炎病毒感染产妇新生儿脐血中DC1,DC2相对数均高于正常新生儿,但无统计学意义;DC1/DC2与对照组相比无差异。23例慢性乙型肝炎病毒感染产妇新生儿脐血中检测到HBVDNA.阴性15例,阳性者8例,其中HBVDNA>106者3例,HBVDNA<106者5例。在脐血中HBVDNA阳性(HBVDNA≥103)的新生儿脐血DC1、DC2相对数均低于脐血HBVDNA阴性(HBVDNA<103)者及健康产妇新生儿,差异有显著性。而8例脐血HBVDNA阳性新生儿中,HBVDNA含量高于106拷贝/mL的新生儿,其脐血中DC1、DC2相对数显著低于脐血HBVDNA含量低于106拷贝/mL者。
结论:1.慢性乙型肝炎病毒感染产妇所生新生儿并未全部感染乙肝病毒,脐血HBVDNA检出阳性率约为34.8%。2.慢性乙型肝炎病毒感染产妇新生儿脐血中树突状细胞亚群DC1、DC2相对数较健康产妇新生儿略高,但差异无显著性。3.慢性乙型肝炎病毒感染产妇新生儿脐血中树突状细胞亚群相对数与脐血中HBVDNA含量有关,HBVDNA阳性者其DC1、DC2相对数均低于HBVDNA阴性者及健康对照,且其DC相对数随HBVDNA含量的增加而减少。