细胞因子IL-32γ对大鼠血管平滑肌细胞增殖、凋亡和分泌的功能研究

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动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)及其并发症如中风、心肌梗塞、脑溢血等是严重危害人类健康的常见疾病。动脉粥样硬化主要累及大、中动脉,是多种因素综合作用的结果。研究表明,血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells ,VSMC)的增殖和向内膜的迁移以及凋亡是动脉粥样硬化(AS)及其并发症发生发展过程中的一个关键因素。近年研究显示,动脉粥样硬化本质上是一种慢性免疫炎性疾病,炎性因子在动脉粥样硬化及其并发症的发生与发展过程中起着重要作用,因而炎性因子对VSMC增殖、迁移、分泌和凋亡作用也就自然成为国内外学者关注的课题。IL-32(interleukin 32)是在自然杀伤细胞(natural killer cell, NK)中新发现的一种致炎细胞因子。几年来的研究发现,IL-32可通过多条信号传导途径,促进细胞分化,参与细胞凋亡,诱导其他致炎细胞因子和趋化因子的生成等,在炎症反应和自身免疫性疾病等方面发挥着重要作用。鉴于IL-32是一种重要致炎细胞因子及致炎细胞因子和趋化因子的诱导剂,且在类风湿关节炎中发挥重要作用,而类风湿关节炎又具有加速动脉粥样硬化特性,据此我们推测,IL-32可能对VSMC的增殖、迁移、凋亡和分泌发挥调节作用,并可能成为动脉粥样硬化防治的一个重要新靶标。因而探索研究IL-32在动脉粥样硬化中的生物学功能及其分子机制,对于揭示IL-32在动脉粥样硬化病理演变中的功能地位、设计合理的治疗药物,进一步提高动脉粥样硬化疾病的治疗水平可能具有重要科学与临床意义。本实验以离体培养的Wistar大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞为研究材料,利用MTT(multiply-table tournament)法检测不同浓度IL-32γ(10,50,100 ng/ml)对VSMC细胞活力的影响。通过流式细胞术检测IL-32以及加入NF-кB和MAPKs信号通路各抑制剂(PDTC是NF-κB抑制剂,PD98059是ERK1/2特异性抑制剂,SB203580是p38MAPK特异性抑制剂,SP600125是JNK特异性抑制剂)后对VSMC周期及其凋亡的影响。RT-PCR检测IGF-1、IGFBP-3、MMP-2、TIMP-1的mRNA的表达.通过实验研究,发现IL-32γ有促进细胞增殖、迁移和抑制细胞凋亡的作用。说明IL-32γ有加速动脉粥样硬化的作用。
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