小曲白酒机械化酿造过程微生物区系动态变化及主要风味产物生成规律研究

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全新机械化酿造技术颠覆了以往传统小曲白酒的生产,因此,微生物的种类、消长规律及产生的主要风味物质也会随之改变,为探索小曲白酒机械化酿造机制,提高白酒的产量与质量,故对其糖化、发酵过程中各类微生物的动态变化及风味产物的研究势在必行。本课题以白酒机械化酿造过程当中的酒醅为实验对象,跟踪糖化和发酵过程,采用传统分离培养方法及16S rDNA、ITS rDNA序列分析等手段,分离并鉴定出细菌、酵母和霉菌的种属。在此基础上,采用平板菌落计数法研究细菌、真菌的消长规律,跟踪分析酿造过程中酒醅温度、含水量、总酸、pH、还原糖、淀粉和乙醇含量的动态变化;采用HPLC和顶空-气相色谱法检测酿造过程中酒醅的主要风味物质含量的变化,并将其偶联各理化指标,探索机械化酿造过程中主要风味物质生成规律。主要研究结果如下:(1)从酒醅分离出的41株微生物中,细菌17株,酵母17株,霉菌9株。17株细菌共鉴定出8个属,17株酵母菌共鉴定出5个属,9株霉菌共鉴定出4个属,初步区分有益菌和有害菌,并对它们的生物安全性进行分析。(2)细菌在糖化期间数量一直呈下降趋势,发酵期间呈现先升后降再升再降的趋势,在第11 d达到最大值1.31×10~7个/g酒醅;酵母菌数量在糖化期呈先升后降的趋势,在发酵期呈先升后降再升再降的趋势;霉菌数量在糖化及发酵过程中均呈现先升后降的趋势。(3)糖化期间温度、含水量、还原糖、总酸和乙醇含量上升,pH和淀粉含量下降;发酵前期的温度、含水量、总酸、pH、还原糖、淀粉和乙醇含量变化较大,发酵后期趋于稳定。(4)检测了四大类主要风味物质:醇类:异丁醇、正丁醇、异戊醇和杂醇油;醛类:异丁醛、异戊醛、乙醛和乙缩醛等;酸类:乙酸和乳酸;酯类:乙酸乙酯、丁酸乙酯、乳酸乙酯等在酿造过程中的含量变化规律。在对酒醅中微生物的消长规律、理化指标和风味物质含量变化的进行了关联解析的基础上,初步揭示了酒体独特韵味的成因:酿造温度的“先高后低”;糖分消耗的“先快后慢”;菌群生长的“先真后细”;产物代谢的“先醇后香”。
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