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[背景]原发性肝细胞肝癌（Hepatocellularcarcinoma,HCC）是常见肿瘤之一,治疗方法有手术切除、局部消融治疗、肝移植、经动脉化疗栓塞、肝动脉灌注化疗和全身治疗。由于早期肝癌不易被发现,晚期肝癌治疗效果欠佳,尽管索拉非尼在很长一段时间内能给晚期肝癌患者获益,但由于耐药的发生,患者治疗效果欠佳。近年来,瑞戈非尼被FDA批准作为肝癌的二线治疗药物。瑞戈非尼通过阻断涉及肿瘤形成、血管生成、肿瘤转移和肿瘤免疫等过程蛋白激酶活性而发挥作用。然而,瑞戈非尼也存在耐药的问题。瑞戈非尼耐药性仍然是成功治疗晚期肝细胞癌（HCC）的关键问题。黄连素（Berberine,BBR）又称小檗碱,是毛茛科植物黄连根茎中存在的一种季铵型异喹啉类生物碱。相关研究表明黄连素具体抑增殖、促凋亡作用,黄连素诱导凋亡与线粒体膜电位降低和BCL-2相关的蛋白（Bax）/BCL-2的改变有关。黄连素还通过产生活性氧（ROS）诱导caspase-3、caspase-8和caspase-9的活化和细胞色素c的释放。黄连素在G1期和G2/M期诱导细胞周期阻滞,具有抗增殖活性。我们前期研究表明,黄连素联合索拉非尼可抑制肝癌细胞增殖,并明显诱导细胞凋亡。然而,黄连素和瑞戈非尼联合效果至今尚无研究报道。因此,本研究旨在探讨BBR联合瑞戈非尼在肝癌中的作用和潜在的分子机制。[目的]探讨BBR和瑞戈非尼联合应用对肝癌细胞增殖和凋亡的影响并探索相关分子机制。[研究方法]1.MTS实验检测BBR和瑞戈非尼单独及联合处理对肝癌细胞增殖的影响。2.计算联合指数CI值评价BBR和瑞戈非尼联合用药对肝癌细胞增殖抑制的协同效应的影响。3.采用EdU/DAPI染色法评价BBR和瑞戈非尼联合应用对肝癌细胞增殖抑制的协同效应的影响。4.采用TUNEL/DAPI染色法、膜联蛋白V-FITC/PI共染色评价BBR联合瑞戈非尼对肝癌细胞凋亡的影响。5.采用Western Blot实验检测药物作用对肝癌细胞凋亡蛋白表达的影响。6.采用裸鼠皮下成瘤方法评价BBR联合瑞戈非尼对体内肝癌细胞增殖、凋亡作用的影响。[结果]1.BBR能抑制肝癌细胞SMMC-7721和Hep3B的活性,具有剂量依赖性,随着浓度增加,抑制增殖能力增强,其IC50分别是232.3 μM和208 μM。瑞戈非尼剂量依赖性地抑制肝癌细胞SMMC-7721和Hep3B的增殖作用,其IC50分别是 8.73 μM 和 10.24 μM。2.BBR（0、100 μM）和瑞戈非尼（0、5、10 μM）联合应用后,5μM瑞戈非尼和100μM BBR、10 μM瑞戈非尼和100 μM BBR的组合能抑制肝癌细胞的增殖能力,联合指数CI值均<1,两种药物具有协同效应。3.EdU分析法检测结果显示,BBR和瑞戈非尼的联合治疗可显著抑制HCC细胞的增殖。4.TUNEL/DAPI双染和流式细胞凋亡检测结果显示,BBR和瑞戈非尼的共同治疗可明显诱导肝癌细胞凋亡,差异有统计学意义。5.BBR与瑞戈非尼联合用药抑制裸鼠皮下瘤的生长。[结论]BBR和瑞戈非尼联合使用通过抑制肝癌细胞的增殖和诱导凋亡发挥协同抗肝癌的作用。