ε-聚赖氨酸产生菌新菌株的筛选鉴定和发酵条件优化

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangfang1896
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
ε-聚赖氨酸(ε-PL)是由L-赖氨酸的S-氨基和另一L-赖氨酸的α-羧基连接而成的氨基酸同型聚合物,具有的水溶性强、抑菌谱广、可以食用且对人体无任何毒副作用等特点,是很理想的生物型防腐剂,因此在近些年来引起了学者们的广泛关注。本论文的研究工作主要由以下三部分内容组成:   本文通过对Nishikawa的方法进行改进,在广东各地的土样中筛选到一株产量为0.846 g/L的新的ε-PL产生菌株,并命名为Str-8。对Str-8菌株进行形态、生理生化和16s rDNA分析,初步确定为不吸水链霉菌(Streptomycesahygroscopicus)。纯化的发酵产物通过水解、质谱、紫外光谱等性质确定为ε-PL。   采用响应面试验设计(RSM)和人工神经网络方法(ANN)对ε-PL发酵培养基中四个组分(酵母浸汁、葡萄糖、硫酸铵、铁离子)对ε-PL产量的影响进行模拟和优化。统计结果表明,RSM拟合的模型决定系数R2=0.7834,而R2ANN=0.992,表明ANN比RSM具有更好的模拟和预测能力。由RSM优化的ε-PL最大产量预测值为1.213g/L。对试验的结果进行验证,产量为1.277±0.0149g/L。基于人工神经网络的遗传算法(GA)所设计得到的ε-PL最大产量为1.992g/L,此时最优组合为酵母浸汁3.365 g/L、葡萄糖10.149g/L,硫酸铵6.785g/L,经试验验证为1.974±0.057 g/L,比RSM优化的结构提高了64.2%,相对于传统的培养基M3G则提高了133%。   考察30 L发酵罐中不同补料速度和pH对S.ahygroscopicus Str-8菌体生长和ε-PL产生的影响。当控制pn大于4.5时,有利于菌体的生长;当控制pH在3.8-4.0时,则适合ε-PL的合成积累。菌体的快速生长伴随着葡萄糖的快速消耗。为了提高ε-PL产量,采取pH分阶段控制补料发酵,阶段Ⅰ,发酵前30h,控制pH大于4.5,菌体干重达到20g/L;阶段Ⅱ,控制pH在4.0,利于e-PL合成,保持葡萄糖浓度在10g/L-20g/L范围内。采用此方法,ε-PL终产量达到20.01 g/L,比分批发酵提高了23倍。   建立了一种相对简便、准确性高的ε-PL产生菌筛选方法,并筛选出与现有白色链霉菌不同的新的产生菌。首先采用ANN-GA法优化了ε-PL产生菌摇瓶培养基,有效提高了ε-PL的产量,探索出一条可行的产ε-PL发酵调控方式,为今后ε-PL的工业化生产打下良好的基础。
其他文献
对初中英语知识的学习和掌握并不能仅仅依靠反复的记忆和抄写.为了迎合新课标中全新的教育理念,我认为我们的英语教学应该建立在互动的基础之上,通过角色扮演、角色设计和角
期刊
为了解南海北部陆缘以及南部陆缘礼乐地区中生代地层广泛发育的褶皱和逆冲断层成因及其所处的大地构造环境,本次对北部陆缘6条NW-SE向地震测线和礼乐地区5条NNW-SSE向的多道反
本文通过从长江口水下三角洲泥质沉积区采集的沉积物柱样测定了柱样中的核素210Pb和137Cs,利用核素210Pb确定了该区域的沉积速率,并且从沉积速率的角度探讨长江口水下三角洲
物质向海洋输送的主要途径有大气沉降和陆地径流。陆地径流对近岸和河口的物质输送起着至关重要的作用,而离陆较远的开阔海域,大气沉降则成为主要的物质来源。辽东湾是渤海的内
采用天然海水和海泥构建了海洋沉积物微生物燃料电池,电流输出可达到0.07 A/m~2。这验证了海洋沉积物中是有产电微生物存在的。采用微生物分离纯化的方法在阳极表面分离了一株厌氧微生物,通过分子生物学的方法鉴定表明该微生物是一种硫酸盐还原菌(SRB),属于脱硫弧菌属。为了验证该微生物的电活性,通过计时电流法在工作电极表面施加一个恒定电压作为微生物燃料电池的阳极室。在不同的极化电压条件下阳极电流都能产
党委讨论决定干部是整个干部工作的关键环节,实现这一环节的科学化、规范化是确保选好人、用准人的关键所在。针对目前党委讨论决定干部运作方法上存在的问题,按照《党政领
本研究基于遥感资料和现场目标观测对南海典型中尺度物理过程引发的生物效应,尤其是对超微型浮游生物的影响进行了探讨。研究分别对南海中尺度物理过程最为活跃的区域(包括南海
学位
知识分子工作,历来是我党的一个工作重点之一,特别是党的十一届三中全会以来,党的知识分子政策更体现了党对知识分子的关怀和重视。邓小平同志把工人、农民和知识分子当作建设有
海湾是大陆海岸线凹向陆地所形成的海域,通常是地表径流的入海口,是海陆交互作用的典型地带。广东省位于华南大陆东部沿岸,岸线曲折,分布众多大小海湾,为人类活动提供了良好的生存