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目的建立血管内皮细胞热损伤模型,检测热损伤预处理后人脐静脉内皮细胞(HUVECs) PPAR β/δ表达的变化,观察PPAR β/δ对热损伤预处理HUVECs抗氧化损伤能力的影响。同时观测HUVECs在热损伤恢复过程中抗凋亡基因Bcl-2、促凋亡基因Bax、P53、APAF-1表达的变化,探讨PPAR β/δ对Bcl-2表达的影响。方法1)分离培养人原代脐静脉内皮细胞(HUVECs),分别采用不同的水浴温度(42℃、43℃、44℃、45℃)及处理时间(15min、20min、25min、30min)造成热损伤,以MTT检测细胞存活率,选择使细胞存活率接近50%的热干预温度及时间作为后续实验的热损伤预处理条件。2)以RT-PCR检测HUVECs在热损伤干预后恢复不同时间(1h、3h、6h、12h、24h、48h、72h) PPAR β/δ、 Bcl-2、P53、APAF-1的mRNA表达变化趋势,对上述受热干预影响变化趋势较为明显的基因以Western-blot检测相应蛋白的表达变化；以HUVECs在热干预恢复过程中PPAR β/δ蛋白达到峰值的时间点组细胞作为HUVECs热损伤模型。3)HUVECs在热损伤预处理、特异性激动剂GW0742激活PPARβ/δ受体、以及shRNA质粒稳定转染干扰PPAR β/δ表达后,再进行H202氧化损伤处理,分别使用Hoechst33258染色、流式细胞计数、DNA-ladder凝胶电泳检测各组HUVECs细胞凋亡率的差异。4)分别以RT-PCR及Western-blot检测各组HUVECs细胞在热损伤上调PPARβ/δ,或激动剂GW0742激活PPARβ/δ受体及shRNA质粒稳定转染干扰PPARβ/δ表达后,细胞Bcl-2mRNA及蛋白表达的变化。结果1)MTT结果提示43℃,25min水浴组HUVECs细胞存活率接近50%(0.49±0.06),可作为后续热损伤预处理条件。2) RT-PCR结果表明经热损伤干预后HUVECs在恢复过程中PPAR β/δ mRNA表达逐步上调,并于48h达到峰值(2.26±0.12VS.1.0in Control Group, P<0.01),抗凋亡基因Bcl-2mRNA在热损伤恢复的早期(3h)下调(0.81±0.07VS.1.0in Control Group, P<0.01),但在恢复后期(24h)其表达显著上升(1.46±0.01VS.1.0in Control Group, P<0.01); APAF-1mRNA在热损伤恢复早期(1h-6h)下调,12h后逐渐恢复正常,而P53mRNA表达变化不明显。Western-blot检测提示PPAR β/δ蛋白表达在恢复第48h达峰值(3.30±0.13VS.1.0in Control Group, P<0.01)。 Western-blot检测Bcl-2及Bax蛋白表达水平发现Bcl-2/Bax比值在HUVECs热损伤恢复早期(1h-6h)下降(0.48±0.12in3h Group VS.1.23±0.22in Control Group P<0.01),而后期(24h-48h)显著上升(1.85±0.10in48h Group VS.1.23±0.22in Control Group P<0.01); APAF-1蛋白在热损伤恢复早期(1h-6h)下调(0.46±0.09in3h Group VS.1.0in Control Group, P<0.01),12h后逐步恢复至正常水平。3) HUVECs经热预处理或使用PPAR β/δ激动剂GW0742激活PPAR β/δ受体,均可显著降低H2O2诱导的细胞凋亡率：(28.86±8.38%in heat pretreated group VS.39.61±6.16in H2O2treated simply group,p<0.01),(33.02±5.12%in GW0742pretreated group VS.39.61±6.16in H2O2treated simply group,p<0.05)。稳定转染PPAR β/δ shRNA质粒则导致HUVECs抗氧化损伤能力降低,细胞凋亡率升局(46.11±5.86%VS.39.61±6.16in H2O2treated simply group,p0.05)。4)热损伤预处理、GW0742预处理HUVECs均可使细胞Bcl-2蛋白表达增高(1.52±0.27in heat pretreated group VS.1.0in Control Group, P<0.01)、(1.98±0.50in GW0742pretreated groupVS.1.0in Control Group, P<0.01)而HUVECs稳定转染PPAR β/δshRNA质粒后Bcl-2蛋白表达降低(0.24±0.09VS.1.0in Control Group, P<0.01),但仅热损伤预处理使HUVECs细胞Bcl-2mRNA表达升高(1.53士0.11VS.1.0in Control Group,P<0.01), GW0742预处理或稳定转染PPAR β/δ shRNA质粒均对细胞中Bcl-2mRNA表达影响不大。结论：1.成功建立了一种血管内皮细胞热损伤模型,血管内皮细胞在热损伤后一段时间内可恢复正常。2.热损伤可诱导HUVECs细胞PPAR β/δ表达上调,于第48h达峰值。3.热损伤可诱导HUVECs抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调,其变化趋势与PPARβ/δ相似,Bcl-2/Bax比值在热损伤恢复早期(1h-6h)降低,而在热损伤恢复后期(24h-48h)显著上调；热干预对P53mRNA表达无明显影响。4.热损伤诱导的PPAR β/δ上调可增强HUVECs抗氧化损伤能力,降低H2O2诱导的细胞凋亡率。5.PPARβ/δ参与Bcl-2蛋白表达的调节而影响细胞凋亡,但PPARβ/δ对Bcl-2的调控可能为间接的转录后调控。血管内皮细胞(HUVECs)在热损伤后一段时间内可恢复正常,细胞经热损伤预处理后PPAR β/δ表达上调,同时其抗氧化损伤能力增强；热刺激诱导的PPAR β/δ通过上调Bcl-2表达使细胞抗凋亡能力增强为其可能机制之一。