补肾活血汤诱导BMSCs成骨分化研究及治疗粗隆间骨折术后的观察

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目的:本研究选用骨髓源性MSCs,探讨补肾活血汤诱导BMSCs向成骨分化的实验研究,为临床运用中药治疗骨缺损、骨折延迟愈合或骨不连、骨坏死及骨折长期制动后出现的废用性骨质疏松等难治性骨病提供新思路和理论依据;通过对股骨粗间骨折患者的临床资料进行分析研究,初步评估补肾活血汤治疗粗隆间骨折术后的疗效,为临床治疗粗隆间骨折提供理论基础。方法:实验方面:制备补肾活血中药含药血清,体外培养分离大鼠的BMSCs传致第3代,分为补肾组、活血组、全方组、成骨诱导剂组、空白对照5组,诱导3d、6d、12d后分别测定ALP活性;诱导15d测上清液钙离子浓度;72h测BMP R2蛋白的表达,观察细胞成骨活性。临床方面:选本院老年性粗隆间骨折术后患者60例,随机分为补肾活血汤组(A组),对照组(B组),各30例。分别于服药前、服药后14d采取外周血,对碱性磷酸酶、钙浓度进行测定,观察术后14d疼痛评分、术后3个月髋关节Harris评分。结果:1、运用全骨髓贴壁分离方法获取纯度较高的BMSCs;2、血清ALP浓度:3d时成骨诱导组相对空白组有统计学意义(P<0.05);6d血清ALP浓度各组间无统计学差异(P>0.05);12d血清ALP浓度补肾组、全方组相对活血组、成骨组、空白组有统计学意义(P<0.05)。3、血清Ca2+浓度:15d补肾组、全方组相对活血组、成骨组、空白组有统计学意义(P<0.05)4、补肾活血汤治疗粗隆间骨折术后,能显著提高血清ALP浓度,治疗前后比较两组间有显著差异(P<0.05);而Ca升浓度治疗前后无明显提高,两组间比较无统计学差异(P>0.05);14d后A组、B组VAS评分对比,有显著性差异(P<0.05);3个月后髋关节功能评分两组对比存在显著性差异(P<0.05)。结论:1、体外全骨髓贴壁细胞分离法获取很高纯度的BMSCs;2、补肾活血汤含药血清能促进BMSCs向成骨分化;3、补肾活血汤可有效缓解粗隆间骨折术后疼痛、促进术后患肢功能恢复及骨折愈合;4、补肾活血汤用于粗隆间骨折术后医疗费用低、疗效确切、可靠。
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