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目的观察survivin抑制剂YM155和高三尖杉酯碱(HHT)对人慢性髓系白血病细胞株K562凋亡和自噬的影响以及细胞凋亡与mTOR通路的关系。方法1.YM155作用实验:采用不同浓度YM155处理K562细胞,用CCK-8法检测细胞增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测survivin、Bcl-2及Beclin1的mRNA表达水平,Western blot检测survivin、Bcl-2、caspase-3、PARP及LC-3的蛋白表达。2.HHT作用实验:采用不同浓度HHT处理K562细胞,用CCK-8法检测细胞增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测mTOR、4E-BP1、p70S6K及Beclin1的mRNA表达水平,Western blot检测caspase-3、Bcl-6、LC-3及mTOR通路相关蛋白的表达。结果1.YM155实验结果:(1)YM155对K562细胞增殖有显著的抑制作用,并呈现时间和剂量双重依赖性的特点。(2)随着YM155浓度的提高及作用时间的延长,survivin和Bcl-2的mRNA及蛋白表达水平逐步下降,而caspase-3、PARP、Beclin1及LC-3的表达水平逐步升高。(3)YM155联合3-MA组的LC-3和caspase-3蛋白表达水平以及K562细胞凋亡率均显著低于YM155单用组。2.HHT实验结果:(1)HHT可抑制K562细胞的增殖,且呈浓度依赖性。(2)随着HHT作用浓度的增加,mTOR、4E-BP1、p70S6K及caspase-3的m RNA及蛋白表达水平升高,Beclin1和LC-3的表达下降。(3)与HHT单用组相比,联用mTOR抑制剂雷帕霉素可显著下调mTOR通路相关蛋白及caspase-3的表达,上调Bcl-6及LC-3的表达。结论1.YM155能诱导凋亡和自噬而抑制K562细胞的增殖,其自噬诱导效应与凋亡诱导效应有协同抗CML作用。.2.HHT通过上调mTOR活性抑制抑凋亡蛋白Bcl-6表达和白血病细胞的保护性自噬而发挥抗CML作用。