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目的 探讨上皮钙黏蛋白(E-cadherin,ECD)的表达在喉癌中的预后价值。方法 在临床研究中,共有79例接受手术的喉癌患者纳入本研究,通过免疫组织化学染色检测喉癌组织中ECD的表达及其与临床病理因素的关系。在体外研究中,培养ECD上调细胞(Ad-ECD)和ECD下调细胞(sh-ECD),并采用流式细胞术检测细胞凋亡。在体内研究中,在裸鼠皮下注射Ad-ECD,sh-ECD和Hep-2细胞,测量肿瘤体积并检测脑,肝,肺组织的ECD表达和肿瘤转移情况。结果 临床资料显示,ECD的表达与喉癌患者的生存率有关(p<0.05),ECD阴性的患者生存率明显低于阳性患者,但其与年龄,性别,淋巴结转移和TNM分期等临床病理特征无显著相关。体外研究中,ECD在sh-ECD细胞中下调,并显着降低Hep-2细胞的凋亡。体内研究中,Ad-ECD组肿瘤生长显著抑制。除肿瘤组织外,脑组织,肝组织和肺组织均未发现明显肿瘤细胞。结论 ECD在喉癌中的下调可能与浸润性肿瘤生长有关,导致预后不良。然而,ECD表达与肿瘤转移无明显相关性。目的 筛选并分析喉癌与癌旁正常组织之间的mRNA表达谱差异,为进一步研究上皮间质转化(EMT)相关基因与喉癌侵袭转移及预后的关系提供线索。方法 收集新鲜冰冻的喉癌组织和癌旁正常喉黏膜标本共6对,采用晶芯mRNA人V4.0表达谱芯片检测,以待检测样品的总RNA为起始,进行体外扩增和荧光标记,标记过程采用晶芯生物芯片通用标记试剂盒。使用Agilent Feature Extraction(vl0.7)软件对杂交图片进行分析并提取数据。然后使用Agilent GeneSpring软件对数据进行归一化和差异分析,计算基因表达差异和统计学显著性P值。当两组样本中mRNA表达差异倍数≥2,且p≤0.05时,定义为差异基因。结果 通过mRNA芯片筛选,我们得到了2253个差异表达的mRNA,其中1014个mRNA表达上调,1149个mRNA表达下调。采用KEGG PATHWAY、PID、Biocarta、Reactome、BioCyc、PANTHER、GO等数据库对差异表达的mRNA进行进一步生物信息学分析,发现与差异表达相关性最高的是细胞外基质相关的信号通路。对基因芯片中与EMT信号通路相关的基因LAMC2(laminin gamma 2)、P-cadherin、ZEB2(zinc finger E-box binding homeobox 2)、E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、Vimentin、Fibronectin进行进一步分析,结果表明仅LAMC2、P-cadherin为差异基因。结论 1.基因芯片技术筛选喉癌特征性mRNA表达谱及EMT相关基因是可行的。2.LAMC2、P-cadherin有可能成为喉癌EMT相关的新的特征性分子标记物。目的 研究EMT相关分子标记物E-cadherin、N-cadherin、P-cadherin、β-catenin、LAMC2(laminin gamma 2)、ZEB2(zinc finger E-box binding homeobox 2)、在咽喉鳞状上皮癌及癌旁组织中的表达及其临床意义。方法 收集南京大学医学院附属鼓楼医院耳鼻咽喉头颈外科2007年3月至2013年11月住院治疗并有完整随访资料的原发喉和下咽鳞状细胞癌患者72例,采用免疫组化的方法检测72对咽喉癌及癌旁组织中对LAMC2、P-cadherin、ZEB2(zinc finger E-box binding homeobox 2)、E-cadherin、N-cadherin、β-catenin的蛋白表达水平并分析其与临床病理因素和预后的关系。结果1.在咽喉癌及癌旁正常组织中LAMC2、P-cadherin、ZEB2、E-cadherin、N-cadherin、β-catenin的表达差异均有统计学意义(P<0.05)。2.咽喉癌中LAMC2与T分期相关(P<0.05);P-cadherin与各临床病理特征均无显著相关性;ZEB2与病理分期、淋巴结转移、分化程度相关(P<0.05);E-cadherin与病理分期和淋巴结转移相关(P<0.05);N-cadherin与T分期、病理分期、分化程度相关(P<0.05);β-catenin与病理分期、淋巴结转移、分化程度相关(P<0.05)。3.单因素生存分析:LAMC2、P-cadherin与预后无相关性;但二者分别与ZEB2、E-cadherin、N-cadherin和β-catenin的联合表达情况与预后均有明显相关性(P<0.05)。4.单因素生存分析:ZEB2、E-cadherin、N-cadherin、β-catenin的表达与预后相关(P<0.05);采用COX回归多变量生存分析,病理分期、ZEB2、N-cadherin、β-catenin均可以作为咽喉癌的独立预后指标;结论 EMT相关蛋白在咽喉鳞状细胞癌和癌旁组织中差异表达。EMT介导肿瘤进展,降低咽喉癌的生存率。LAMC2、P-cadherin与其他因子的联合表达与预后有明显相关。病理分期、ZEB2、N-cadherin、β-catenin均可作为咽喉癌的独立预测因子。