ROS响应型丝素蛋白复合材料的制备及其结构性能研究

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丝素蛋白(SF)是一种天然高分子蛋白,生物相容性好,生物可降解,在生物医用领域研究广泛。SF在载药系统上有很大应用,但不具备靶向性和智能响应性,在临床治疗过程中,尤其肿瘤化疗过程中,造成严重的副作用或正常组织的损伤。酮缩硫醇(TK)是用于制备药物递送的活性氧(ROS)响应性聚合物的部分,对于丰富的ROS有响应性,会发生化学键断裂,从而释放药物。本文合成了 ROS响应的TK,制备了 SF/TK复合膜、多孔支架和微球,研究了复合材料的结构、ROS响应性、载药能力和药物释放。采用质谱(MS)和核磁共振光谱(1H-NMR)鉴定了 TK的分子量和结构。采用傅里叶红外(FTIR)、拉曼(Raman)、X射线衍射(XRD)研究SF/TK复合材料的结构,发现TK的引入不影响SF材料形成稳定的β-折叠结构和SilkⅡ结晶结构。X射线光电子能谱(XPS)结果表明加入TK后引入了C-S基团。通过能谱仪(EDS)扫描观察到,引入TK后,S元素含量增加。电镜(SEM)观察发现SF/TK多孔支架表面呈现均匀的孔隙,形状规则,而SF/TK微球形态呈大小均一的球形,成型良好,通过动态光散射(DLS)测定了 SF/TK微球平均粒径为272 nm。通过37℃含50mM KO2的氧裂解环境处理,研究SF/TK复合材料的ROS响应性。通过电镜观察发现,与对照组相比,SF/TK复合多孔支架在氧裂解之后出现了明显的孔变形、碎片化积聚等现象,当SF:TK=100:3时,呈现显著的裂解效果,100:5时多孔支架内部裂解破坏更明显。通过压缩性能测试发现,与对照组相比,SF/TK复合多孔支架在氧裂解后压缩强度下降,尤其当SF:TK=100:3时,压缩强度变化最明显,下降了17.09%。同时,对氧裂解前后的SF/TK复合光滑膜进行拉伸力学实验,发现经氧裂解后,其拉伸断裂强度也是SF:TK=100:3时下降最明显,下降了 21.09%。SF/TK复合光滑膜和多孔支架的氧裂解结果表明,TK的加入赋予了复合材料ROS响应性,TK的氧裂解可促使材料的分解和破碎。随着TK比例的增加,材料的ROS响应性能逐渐增加,说明TK成功地对SF进行了化学键连接,并作为桥梁连于SF分子之间。根据ROS响应结果,以SF:TK=100:3比例制备SF/TK微球。选择治疗乳腺癌的疏水性药物喜树碱(CPT),探索微球载药能力与药物释放。初始添加2 mg CPT(2 mL 2%SF/TK溶液)时,SF/TK载药微球的载药率和包封率分别为2.08%和66.26%,平均粒径400nm左右,保持均匀的球状。在氧环境中研究了 SF/TK载药微球的药物释放,纯SF载药微球作为对照组。DLS结果表明,SF/TK载药微球的粒径随着氧裂解时间增长而逐渐减小,裂解16 h后,粒径从426nm缩小到257 nm,而对照组中的粒径没有明显减小。氧环境下的药物释放行为显示,SF/TK载药微球的药物释放速度优于对照组,尤其是前12 h时,释放2 h后,SF/TK载药微球的释放率是纯SF载药微球的2.5倍。
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