【摘 要】
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目的:非小细胞肺癌（NSCLC）经表观遗传学治疗后分析筛选出差异性表达的LncRNA XLOC＿012366,通过体外实验探讨其对NSCLC细胞增值、迁移侵袭、凋亡的影响,进一步观察其对EGFR-PI3K/AKT通路的影响。方法:1.qRT-PCR检测实验肺癌组织和肺癌细胞转染LncRNA XLOC＿012366的表达水平以及EGFR的表达水平。2.cell counting kit 8（CCK-
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目的:非小细胞肺癌（NSCLC）经表观遗传学治疗后分析筛选出差异性表达的LncRNA XLOC＿012366,通过体外实验探讨其对NSCLC细胞增值、迁移侵袭、凋亡的影响,进一步观察其对EGFR-PI3K/AKT通路的影响。方法:1.qRT-PCR检测实验肺癌组织和肺癌细胞转染LncRNA XLOC＿012366的表达水平以及EGFR的表达水平。2.cell counting kit 8（CCK-8）、Ed U、克隆形成实验检测转染后各组细胞增殖生长能力。4.细胞划痕实验检测转染后各组细胞的迁移作用。5.Transwell检测转染后各组细胞侵袭和转移能力。6.Tunel实验、流式细胞仪检测转染后各组细胞的凋亡。7.Western blot实验检测转染后肺癌细胞中EGFR-PI3K/AKT通路中关键的相关蛋白表达。结果:1.qRT-PCR实验结果表明LncRNA XLOC＿012366在肺癌组织及细胞中表达上调。2.CCK-8实验检测发现干扰LncRNA XLOC＿012366组肺癌细胞增殖速度明显减慢（A549组P＜0.001,H838组P＜0.001）。3.Ed U实验表明干扰LncRNA XLOC＿012366组肺癌细胞增殖数目最少（A549组P＜0.01,H838组P＜0.0001）。4.克隆形成实验表明干扰LncRNA XLOC＿012366组肺癌细胞生长能力显著减弱（A549组P＜0.0001,H838组P＜0.001）。5.细胞划痕实验观察到干扰LncRNA XLOC＿012366组细胞迁移能力最不明显（A549组P＜0.0001,H838组P＜0.001）。6.Transwell检测干扰LncRNA XLOC＿012366组细胞侵袭与转移能力显著减弱（A549组P＜0.05,H838组P＜0.001）。7.Tunel实验结果显示:与对照组相比,干扰LncRNA XLOC＿012366组细胞凋亡数量显著增高（A549组P＜0.01;H838组有明显差异,P＜0.01）。8.流式细胞仪检测结果显示:干扰LncRNA XLOC＿012366组细胞凋亡的百分比增高（A549组P＜0.0001,H838组P＜0.0001）。9.qRT-PCR检测结果表明干扰LncRNA XLOC＿012366组的EGFR表达量减低（A549组P＜0.0001,H838组P＜0.01）。10.Western blot检测结果显示:肺癌细胞转染干扰LncRNA XLOC＿012366组中,EGFR-PI3K/AKT通路相关蛋白表达水平显著降低。11.EGFR与LncRNA XLOC＿012366呈正相关。结论:经表观遗传治疗筛选的LncRNA XLOC＿012366,干扰其表达抑制非小细胞肺癌转移。另一方面LncRNA XLOC＿012366还通过调控EGFR-PI3K/AKT通路抑制肿瘤细胞生长,介导肺癌转移抑制。
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