受体介导的粘附粉末制备及其细胞粘附特性的初步研究

来源 :重庆大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yeyuan1985
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靶向给药系统(targeting drug delivery system, TDDS)是第四代药物输送系统。按靶向的源动力可以分为主动靶向制剂、被动靶向制剂、前体靶向药物。其中的主动靶向制剂是利用抗原-抗体或配体-受体等分子亲和作用将药物定向分布在靶组织或靶细胞内,研究对象以癌症为主。精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸(Arg-Gly-Asp-Ser,RGDS)是各种基质蛋白质中最常见的基本构成成分,能够竞争性地与细胞表面的整合素受体结合,具有能定位于多种细胞粘附受体的能力以及对细胞固定、细胞性能和细胞存活率有生物影响的特性。本论文的研究目的:利用RGDS配体与细胞表面的整合素受体之间的特异性粘附的性能,以生物相容性好的可生物降解的天然高分子材料-壳聚糖为载体,以甘草酸为模型药物,探究甘草酸缓释微球的制备工艺、工艺参数与微球成形的之间的关系。对优化的微球表面进行RGDS修饰及其与细胞的粘附性能的检测;并在此基础上考察了载药微球的体外释放规律,稳定性和微球的粉末特性的研究,为其应用提供理论与实验指导。获得的结论有以下几点:①采用乳化交联技术制备甘草酸壳聚糖微球。通过单因素设计、均匀设计考察工艺参数与微球的性能之间的关系。利用统计学软件SPSS分析得到的多元线性回归方程如下:y=48.140-10.370X1-1.600E-02X3+28.364X4-29.196X5,r=0.915(粒径);y=-22.761+30.454X1-2.697E-03X3+8.596X4-10.811X5,r=0.946(包封率);y=0.277+0.350X1-2.013E-04X3+9.079E-02X4-0.162X5,r=0.953(载药量)。②利用吸附法对甘草酸壳聚糖微球进行RGDS修饰。由壳聚糖、甘草酸、壳聚糖微球、接枝RGDS微球的红外图谱可以说明微球的形成以及微球与RGDS接枝的完成。利用考马斯亮蓝染色法也验证了微球上RGDS的存在。③细胞水平实验,主要考察微球与细胞之间的粘附性能。扫描电镜照片显示在细胞表面空白微球几乎不存在,而在细胞表面有一个或多个RGDS微球存在。结果表明接枝RGDS的微球,具有RGDS的活性,与细胞之间有特异粘附的能力。④壳聚糖微球的稳定性及粉末特性实验结果表明:可用60Co辐射法对微球进行灭菌;在常温及4℃条件下其能够很好的保存;微球能满足可吸入粉末的要求。
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