研究已经表明秀丽隐杆线虫是一种优良的高通量药物筛选模型,但是基于这一平台的高通量筛选目前还存在线虫培养困难、检测方法未标准化等缺点,所以难以在大范围内推广应用。本文以建立标准化的筛选检测方法并构建相应的高通量筛选检测试剂盒为目的,开展了以下三种试剂盒的研制工作,为实现这些试剂盒的推广应用提供理论和技术支持。基于秀丽隐杆线虫的下调Ras过度激活的抗肿瘤药物高通量筛选试剂盒的研制,以秀丽隐杆线虫的野生型比率为评价指标,确定了受试药物的适宜有机溶媒分别为DMSO≤2%,PEG-400≤2%,Tween-80≤3%;处理方法为加受试药物处理孵化48 h内的L1期MT2124秀丽隐杆线虫至其发育为成虫;阳性对照为3.2μg/mL的RBS;秀丽隐杆线虫的适宜贮存条件为4℃条件下贮存3天。故确定本试剂盒主要由S培养液、MT2124秀丽隐杆线虫、阳性对照药品、NaN₃、96孔板等几部分组成,在4℃条件下保存运输时,3天内有效。基于秀丽隐杆线虫的下调体内ROS的抗氧化药物高通量筛选试剂盒的研制,以ROS水平的高低为评价指标,确定了H₂DCF-DA的染色温度为20℃,染色时间为30 min;处理方法为加受试药物处理孵化48 h内的L1期N2秀丽隐杆线虫至其发育为L4期;阳性对照为4 mM的Vc。故确定本试剂盒主要由S培养液、N2秀丽隐杆线虫、阳性对照药品、H₂DCF-DA染液、黑色384孔板等几部分组成,但其受试药物的溶媒和贮存运输条件还需要进行进一步的研究确定。基于秀丽隐杆线虫的药物急性毒性高通量检测试剂盒的研制,以秀丽隐杆线虫的死亡率为评价指标,以HgCl₂为处理药物,确定了处理载体为透明384孔板,且每孔的最佳L4期N2秀丽隐杆线虫量为50条左右;处理方法为加SYTOX Green与受试药物一同处理L4期N2秀丽隐杆线虫量至其出现大量死亡;结果检测方法为荧光拍照记录法。故确定本试剂盒主要由K培养液、N2秀丽隐杆线虫、SYTOX Green染液、透明384孔板等几部分组成,但其受试药物的溶媒和贮存运输条件还需要进行进一步的研究确定。