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乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)普遍存在于大多数动物体内,调控动物体神经传导、肌肉运动、感觉、消化等功能的发挥。ACh在动物的生殖和发育过程中,对卵的排出,精卵的结合,卵裂期细胞内、细胞间信息的传递以及后续的生长发育过程也起重要的调控作用。五羟色胺(serotonin,5-HT)作为一种神经递质和胃肠道激素广泛分布于脊椎动物和无脊椎动物体内,在生物的繁殖、感知及行为功能方面起到重要的调节作用。在动物体早期形态发育过程中,5-HT作为一种发育的信号,调控配子的发生、早期卵裂过程和细胞的分化等功能的发挥。本文采用免疫组织化学S-ABC法(strept avidin-biotin complex),对乙酰胆碱酯酶(AChE)及乙酰胆碱的M1受体(M1 mAChR)、M3受体(M3 mAChR)、α1烟碱型乙酰胆碱受体(α1 nAChR)和5-HT及五羟色胺的1A受体(5-HTR 1A)在柄袋沙蠋(Arenicola brasiliensis)胚胎、幼虫以及成体的体壁及其附属物、消化系统、神经系统等部位的分布进行了定位。柄袋沙蠋胚胎和幼虫免疫组化定位结果显示,从未受精卵至研究的5刚毛节幼虫均有AChE、M1 mAChR、M3 mAChR、α1 nAChR、5-HT和5-HTR 1A阳性反应物质分布,但不同物质在同一发育阶段、同一物质在不同发育阶段分布的密度及程度均存在差异。总体来看,AChE与ACh的三种受体的分布、5-HT与5-HTR 1A的分布、AChE与5-HT的分布均呈现出类似的规律,强阳性反应的分布部位大致相同。未受精卵中阳性反应多集中在细胞膜及周围的胞质和核周围的胞质。阳性反应在受精卵中多集中在核区、细胞膜及周围的胞质。卵裂期阳性反应主要分布于细胞膜和核的周围。原肠胚外胚层阳性反应较内胚层强。幼虫期阳性反应主要分布于头区、纤毛着生处、刚毛着生处和消化道等部位。AChE、M1 mAChR、M3 mAChR、α1 nAChR、5-HT和5-HTR 1A在柄袋沙蠋胚胎和幼虫中分布的广泛性,表明ACh、5-HT可能共同参与柄袋沙蠋生长发育的调节。柄袋沙蠋成体免疫组化定位结果显示,AChE、M1 mAChR、M3 mAChR、α1 nAChR、5-HT和5-HTR 1A在柄袋沙蠋体内广泛分布,但分布规律有所不同。柄袋沙蠋体壁主要由表皮、环肌、纵肌组成。除M3 mAChR在体壁上皮细胞、环肌、纵肌均呈较弱的阳性反应外,AChE、M1 mAChR、α1 nAChR、5-HT和5-HTR 1A均呈较强的阳性反应,且上皮细胞的游离端有大量的阳性反应物质分布。体壁的附属物主要包括鳃、疣足、刚毛和肾管等结构。鳃为柄袋沙蠋的呼吸器官,由一层上皮细胞构成。几种神经递质在鳃丝上皮细胞中的分布均较多,且鳃丝上皮细胞的游离端有阳性反应物质分布。疣足和刚毛为柄袋沙蠋的运动器官,疣足由上皮细胞和疣足肌构成。疣足上皮细胞和疣足肌均有AChE、M1 mAChR、M3 mAChR、α1 nAChR、5-HT和5-HTR 1A阳性反应分布,但α1 nAChR较其余几种神经递质呈现出较弱的阳性反应。刚毛呈AChE、M1 mAChR、M3 mAChR、α1 nAChR、5-HT和5-HTR 1A强阳性或阳性反应。肾管为柄袋沙蠋的排泄器官,肾管上皮细胞呈AChE、M1 mAChR、M3 mAChR、α1 nAChR、5-HT和5-HTR 1A强阳性或阳性反应,其上皮细胞游离端有阳性颗粒分布。柄袋沙蠋的消化系统主要由食道、食道侧囊、胃、肠、直肠组成。消化系统的组织结构由内向外主要由粘膜层、粘膜下层和外膜构成。免疫组化结果显示,柄袋沙蠋消化道中均有AChE、M1 mAChR、M3 mAChR、α1 nAChR、5-HT和5-HTR 1A免疫阳性反应细胞和反应物质分布,但阳性细胞和阳性反应物质的数量、分布及强弱程度不同。总体来看,强阳性细胞多分布于粘膜层和外膜,粘膜层游离端有强阳性物质分布,粘膜下层多呈弱阳性反应。柄袋沙蠋的神经系统主要包括咽上神经节、围咽神经、咽下神经节和腹神经索。神经节分为皮质部和髓质部。在神经节的皮质部和髓质部中均观察到AChE、M1 mAChR、M3 mAChR、α1 nAChR、5-HT和5-HTR 1A免疫阳性神经细胞和神经纤维,但强阳性神经细胞主要分布于皮质部,神经纤维多呈阳性或弱阳性反应。另外,M3 mAChR和α1 nAChR在咽下神经节的分布程度显著高于在其余部位的分布程度。AChE、M1 mAChR、α1 nAChR、5-HT和5-HTR 1A在柄袋沙蠋的体壁及其附属物、消化道、神经系统有广泛的分布,表明其对柄袋沙蠋的神经传导、消化和运动等各种生理功能可能有着重要的作用。几种神经递质在柄袋沙蠋体内各部分的分布密度不同,可能与其在各部位发挥的功能不同有关。