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多囊卵巢综合征是是妇女常见的内分泌疾病，它不仅出现内分泌失调，也同时伴有生殖障碍。目前认为，多囊卵巢综合征的卵巢功能异常与胰岛素抵抗有关，但现有的对胰岛素抵抗的研究都集中在胰岛素作用的靶组织——骨骼肌、脂肪、肝脏等，很显然，用卵巢组织以外的胰岛素抵抗和高胰岛素血症来解释卵巢本身的功能障碍是不确切的，而且卵巢功能障碍仅存在于多囊卵巢综合征患者而不常见于Ⅱ型糖尿病患者，这也说明多囊卵巢综合征患者卵巢本身的糖代谢异常和胰岛素抵抗与卵巢功能障碍有密切的关系。卵巢是女性生殖功能的基本单位，也是能量代谢的活跃器官。它含有介导胰岛素所有作用的信号蛋白和代谢酶。因此本研究建立了体外的卵巢胰岛素抵抗模型，从卵巢内分子水平探讨胰岛素信号传导和促性腺激素信号传导的相互关系，揭示多囊卵巢综合征患者糖代谢异常和生殖功能障碍的关系。祖国医学对多囊卵巢综合征早有认识，其症状类似于痰湿型不孕和闭经，痰浊是引起其病的关键因素；并且中医所说胞宫相当于现代医学的子宫和卵巢，因此吴效科课题组认为痰浊是多囊卵巢综合征患者生殖障碍和代谢异常的共同病机，多囊卵巢综合征即痰壅胞宫所致。因此本研究建立了体外的卵巢胰岛素抵抗模型，从卵巢内分子水平探讨胰岛素信号传导和促性腺激素信号传导的相互关系，即模拟了痰壅胞宫的模型，从而揭示多囊卵巢综合征患者糖代谢异常和生殖功能障碍的关系。目的：探索痰壅胞宫对卵巢自身的影响，以及它与多囊卵巢综合症的关系。因此用地塞米松人工诱导猪卵泡膜细胞产生胰岛素抵抗，以及中药小檗碱、葛根素对胰岛素抵抗的卵泡膜细胞功能调控。方法：收集新鲜猪卵泡膜细胞进行体外培养，经地塞米松作用48h后，检测猪卵泡膜细胞对糖利用率情况。同时采用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹技术(WB)和激素水平测定，检测小檗碱和葛根素对卵泡膜细胞内胰岛素信号传导分子和甾体激素合成的影响。结果：1．地塞米松作用48h后细胞内[~3H]标记的2-DG葡萄糖摄取量降低1／2；细胞上清液葡萄糖含量葡萄糖浓度升高1／3。2．RT-PCR和WB结果显示：卵泡膜细胞产生胰岛素抵抗后，胰岛素受体底物-1(IRS-1)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的mRNA和蛋白表达水平下降；过氧化酶活化增生受体(PPAR)γ和细胞色素P45017羟化酶(CYP17)的mRNA或蛋白表达水平上升。应用中药小檗碱和葛根素进一步作用48h后，抵抗细胞内的上述胰岛素信号分子和CYP17表达明显逆转。3．猪卵泡膜细胞产生胰岛素抵抗后，睾酮(T)水平升高约1倍(0.38±0.01μg／mL vs 0.82±0.20μg／mL，p＜0.05)，催乳素(PRL)水平升高(20.58±2.52μIU／mL vs. 58. 44±5.85μIU／mL，p＜0.05)，血清孕酮(P)水平未见明显变化(0.79±0.04ng／mL vs 0.75±0.04ng／mL，p＞0.05)。小檗碱和葛根素显著降低T浓度(p＜0.05)。结论：1．地塞米松能够诱导卵巢卵泡膜细胞产生胰岛素抵抗；并且卵泡膜细胞产生胰岛素抵抗后雄激素合成能力显著增强。而胰岛素抵抗和高雄激素血症正是多囊卵巢综合征功能障碍特征之一，说明此模型基本构建成功。2．回答了痰壅胞宫对卵巢本身的影响是卵巢自身的胰岛素抵抗和高雄激素合成亢进。3．中药小檗碱和葛根素能降低卵泡膜细胞的胰岛素抵抗程度和雄激素合成，并且证明小檗碱和葛根素的增敏作用类似于二甲双胍而不同于曲格列酮。提示中药增敏剂可以用于多囊卵巢综合征的治疗，可以起到类似胰岛素增敏剂的作用，并且可以起到改善生殖功能的作用。作为中药增敏剂有良好研究和开发前景。