智能型分子印迹荧光纳米传感器的制备及其在灵敏检测肿瘤标志物中的应用

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甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,AFP)作为肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的重要血清标志物,是诊断HCC的特异性临床指标。目前AFP的检测方法主要有化学发光免疫法(CLIA)、酶联免疫法(ELISA)及放射免疫分析法(RIA)等,但免疫分析法具有仪器价格昂贵、响应速度慢、易受基质干扰及选择性低等缺点,使其在实际应用中受到了一定程度的限制。因此探索一种简便快速、高选择性和高灵敏度AFP检测方法势在必行。本研究以乙烯基修饰的碳点(V-CDs)为信号单元和载体,AFP为模板蛋白,N-异丙基丙烯酰胺(NIPAM)和4-乙烯基苯硼酸(4-VPBA)为温度和pH敏感的功能单体,水为致孔剂,N,N’-亚甲基双丙烯酰胺(MBA)和过硫酸铵(APS)为交联剂和引发剂,成功制备出智能型分子印迹荧光纳米传感器(CDs@MIPs)。采用傅立叶红外光谱(FT-IR)、透射电子显微镜(TEM)、X衍射光谱(XRD)和元素分析等方法对CDs@MIPs的形貌、结构和元素含量进行分析。通过对CDs@MIPs的合成条件、识别性能以及温度和pH敏感性的考察,发现CDs@MIPs具有良好的识别能力,可以通过改变温度和pH值的方式调节CDs@MIPs的识别性能。CDs@MIPs的荧光淬灭程度与目标蛋白AFP的浓度在10~100 ng mL-1范围内呈现良好的线性关系,相关系数(R=0.9750),检测限(limitofdetection,LOD)为 0.4740ngmL-1。所合成的CDs@MIPs成功用于HCC病人血清样品中AFP浓度的定量检测,其检测结果与ELISA法测定的结果一致。本研究结果表明,成功建立的简单快速、高选择性和高灵敏度的痕量AFP检测的新方法,为肿瘤标志物的检测提供了新思路。
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