【摘 要】
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β-葡聚糖是美白护肤品的重要添加成分,但是其发挥美白功效的作用机制尚不明确。本课题以斑马鱼为动物模型,对双孢蘑菇来源的β-葡聚糖在抑制黑色素形成的作用机制进行了探究。本研究首先通过对斑马鱼体表的色素沉着面积进行统计分析,证明β-葡聚糖处理可以明显抑制斑马鱼幼鱼以及成鱼体表黑色素的沉积;并且利用体外促黑素(8-MOP)干扰、体内过表达调控黑色素形成的基因mitfa、tyr m RNA诱导黑色素大量形
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β-葡聚糖是美白护肤品的重要添加成分,但是其发挥美白功效的作用机制尚不明确。本课题以斑马鱼为动物模型,对双孢蘑菇来源的β-葡聚糖在抑制黑色素形成的作用机制进行了探究。本研究首先通过对斑马鱼体表的色素沉着面积进行统计分析,证明β-葡聚糖处理可以明显抑制斑马鱼幼鱼以及成鱼体表黑色素的沉积;并且利用体外促黑素(8-MOP)干扰、体内过表达调控黑色素形成的基因mitfa、tyr m RNA诱导黑色素大量形成后,β-葡聚糖依然具有显著抑制黑色素形成的效果。本研究接下来通过半定量PCR和整胚原位杂交技术检测黑色素形成过程关键基因的转录水平,结果表明β-葡聚糖处理可以抑制tyr、tyrp1b、dct和silv m RNA水平;此外,Western Blot和酶活性检测结果表明β-葡聚糖能够抑制酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白2(TRP2)和银色毛发(SILV)等关键蛋白的表达。并且能通过抑制酪氨酸酶活性从而抑制黑色素形成。本研究进一步对β-葡聚糖抑制黑色素形成的作用机理进行初步探索。β-葡聚糖可以抑制由于过表达mitfa引起的下游基因tyr、tyrp1a、tyrp1b和dct表达增加。不仅如此,β-葡聚糖处理还可抑制不同发育时期的mc1r表达,提示其通过抑制c AMP/PKA信号通路,下调mitfa基因的表达从而调控黑色素细胞分化。最后,本研究对β-葡聚糖抑制黑色素形成的可逆性进行了验证。结果表明幼鱼在β-葡聚糖撤除4d后体表的黑色素沉积能够恢复至正常水平,说明β-葡聚糖对斑马鱼黑色素的抑制效果具有可逆性。上述实验结果表明,β-葡聚糖能显著抑制斑马鱼黑色素的形成,本文为β-葡聚糖在美白产品领域的开发和应用方面提供了有力支撑。
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