本文是在衍生化试剂3-氨基-9-乙基咔唑(AEC)对于单糖衍生化分析的基础上,对寡糖及糖蛋白生物样品中N-糖链进行HPLC柱前衍生化分析,并进行在线LC-ESI-MS的方法学考察,取得了很好的效果,其研究结果如下：1选用AEC对寡糖样品进行柱前衍生化标记,然后进行HPLC、ESI-MS及在线LC-ESI-MS分离分析及结构鉴定。衍生反应温度为70℃,1小时,并且对液质联用的液相色谱条件进行优化,我们选用反相C18柱(5μm,250 mm x 4.6 mm),最终将液相色谱条件确定为：流动相A,0.01 mol／L醋酸铵缓冲溶液(pH4.5),流动相B,乙腈；梯度洗脱程序：0 min,10%B-80 min,25%B;流速,0.2 mL／min;紫外检测波长254 nm,对不同聚合度壳寡糖混合物实现了同步分离并结构鉴定。该方法准确,可靠。2在上述分析寡糖的基础上,进一步扩大AEC衍生试剂的适用范围,将其用于糖生物样品鸡白蛋白和核糖核酸酶B解离N-糖链的柱前衍生化分析中,建立了糖蛋白中N-糖链的AEC柱前衍生化HPLC、ESI及LC-ESI-MS分析模式。我们首先用PNGaseF酶释放糖蛋白中的N-糖链,对其进行分离纯化后,用AEC对糖链进行衍生,然后对衍生物进行HPLC分离和ESI-MS结构检测,并对其进行了在线LC-ESI-MS分析,该方法为进一步探索AEC在生物样品N-糖链的应用打下良好基础。