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原发性肝癌(Hepatocellular Carcinoma, HCC)是人类最常见的致命性恶性肿瘤之一,从全球来看,患病人数排名第五,在癌症中致死率排名第三,仅次于肺癌和胃癌。对于有手术指征的患者来说,手术切除仍然是治疗原发性肝癌的主要治疗手段,但是术后复发率较高,5年生存率只有17%到53%。尽管很多临床病理特征能起到预测肿瘤复发和评估预后的作用,比如说肿瘤的大小、包膜、HBV或者HCV感染、肝内播散病灶、手术切缘与肿瘤的距离、血管浸润、肿瘤细胞的分化程度等等。但是肝癌的复发机制及其影响因素仍不清楚。吲哚胺2,3双加氧酶(Indoleamine2,3-dioxygenase, IDO)是存在人体内参与免疫调节的色氨酸代谢限速酶,很多研究证明,IDO的激活与很多临床病理特征有关,比如说胎儿与母亲的免疫耐受、感染、自体免疫性疾病、肿瘤的发生发展、同种异体移植物抗宿主病等。在很多肿瘤的患者当中,IDO的高表达往往提示预后较差。同时,IDO的表达与肿瘤的微环境有关,例如对卵巢癌及子宫内膜癌患者的研究发现,IDO的高表达与CD8+、CD57+T淋巴细胞的减少有关。同时,下调IDO的表达后,能促进体内NK细胞对宫颈癌细胞的杀伤作用,并促进NK细胞聚集在肿瘤周围。另外,IDO能促进胰腺导管内乳头状黏液性肿瘤患者体内FOXP3+T淋巴细胞的增值,因而,检测胰腺导管内乳头状黏液性肿瘤患者外周血中FOXP3+T淋巴细胞的数量能预测肿瘤的侵袭性。另有研究发现,IDO也能促进CD4+CD25+FOXP3+T淋巴细胞的增值,而且这一作用能被IDO的抑制剂1-甲基色氨酸所抑制。近年来很多研究证实存在于肿瘤微环境中的肿瘤浸润淋巴细胞在很大程度上与肿瘤的复发有关,同时,IDO能通过改变肿瘤微环境,诱导肿瘤发生免疫耐受,促进肿瘤的发生和发展,并在很大程度上影响了患者的预后。因而研究IDO与原发性肝细胞肝癌之间的关系具有一定的临床意义。本研究共分两部分：第一章原发性肝细胞肝癌中IDO的表达目的：探讨IDO mRNA和蛋白在原发性肝细胞肝癌中的表达与临床病理特征之间的关系。方法：1、收集南方医科大学南方医院肝胆外科2009年11月～2012年12月接受手术治疗的原发性肝细胞肝癌患者的组织标本；2、采用荧光定量PCR检测61例肝癌患者的癌组织、非癌组织以及7例肝脏良性病变的正常肝脏组织中IDO mRNA的表达；3、采用免疫组化和免疫荧光技术检测89例肝癌患者的癌组织、癌边缘组织、对应的非癌组织以及7例肝脏良性病变的正常肝脏组织中IDO蛋白的表达。4、统计学处理：应用SPSS13.0统计软件对数据进行统计学处理,分析原发性肝细胞肝癌组织中IDO的表达与临床病理参数及预后之间的关系。结果：1、61例原发性肝细胞肝癌患者肝癌组织中IDO mRNA的表达量较对应的非癌组织及对照组明显升高(P<0.001)。2、癌组织中IDO mRNA表达的强弱与患者术后复发及无瘤生存时间、是否发生转移、TNM分期有关系(P<0.05)。与肝硬化、AFP、病理分化程度、巴塞罗那分期、性别、年龄、乙型肝炎表面抗原、肿瘤的大小及数目无关(p>0.05).3、癌组织中IDO蛋白表达的强弱与术后复发率及无瘤生存时间、TNM分期、是否发生转移有关(P<0.05)。与肝硬化、AFP、病理分化、巴塞罗那分期、性别、年龄、乙型肝炎表面抗原、肿瘤的数目、大小无关(p>0.05)。4、癌边缘组织IDO表达强度高于癌组织患者的复发率和转移率均比癌边缘组织表达强度低于癌组织的患者高(p=0.001)。结论：1、肝癌组织中IDO mRNA的表达量较对应的非癌组织及肝脏良性病变的正常肝脏组织明显升高；2、IDO蛋白主要在癌组织和癌边缘组织的细胞胞浆中表达。3、无论是在mRNA水平还是蛋白水平,IDO的高表达都可能影响原发性肝细胞肝癌患者的预后。第二章肝癌组织中浸润的淋巴细胞的检测目的：分析第一章中得出的IDO蛋白表达的结果与肿瘤微环境中CD3+、CD4+、CD8+、FOXP3+T淋巴细胞的数量及CD4/CD3、CD8/CD3、FOXP3/CD3比例之间的关系。方法：1、收集南方医科大学南方医院肝胆外科2009年11月～2012年12月接受手术治疗的89例原发性肝细胞肝癌患者的组织标本。2、免疫组化检测89例原发性肝细胞肝癌患者的癌组织实质细胞中浸润的CD3+、CD4+、CD8+、FOXP3+T淋巴细胞的数量。3、统计学处理：应用SPSS13.0统计软件对数据进行统计学处理,分析第一章中IDO蛋白不同表达强度的结果与肿瘤浸润的CD4+、CD8+、FOXP3+T淋巴细胞以及CD4/CD3、CD8/CD3、FOXP3/CD3的比例之间的关系。结果：IDO表达的强度与肿瘤浸润的CD4+、D8+、FOXP3+T淋巴细胞数目及CD4/CD3、CD8/CD3、FOXP3/CD3之间的比例有关,随着IDO表达程度的增强CD4+、CD8+T淋巴细胞数目减少,CD4/CD3、CD8/CD3之间的比例明显降低,但是FOXP3+调节性T淋巴细胞数目明显增多,FOXP3/CD3之间的比例也明显增高(p<0.001)。结论：在原发性肝细胞肝癌组织中IDO蛋白表达的强弱与肿瘤浸润的淋巴细胞亚群比例失调密切相关,肿瘤微环境中存在免疫功能紊乱,从而影响患者的预后。