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氨基酸是构成机体蛋白质的主要物质,对机体生命活动有重要影响,并且是畜禽生产效益中影响最大的营养成分。赖氨酸(Lys)、蛋氨酸(Met)通常作为畜禽第一、第二限制性氨基酸,它的不同含量极大的影响着畜禽的氮利用率和生产性能。本文设计两个试验研究日粮不同Lys、Met比例对生长肉兔生产性能、营养物质消化代谢和肠道屏障的影响。试验1:体重相近(1100±10g)的35日龄雄性肉兔80只,随机将其分为8组,每组10只。根据家兔营养需要选择了8种不同的氨基酸添加剂量,分别为:Lys0.75%/Met 0.1%、0.75%Lys/0.25%Met、0.75%Lys/0.5%Met、Lys 0.75%/Met 0.75%、Lys 0.6%/Met 0.4%、0.8%Lys/0.4%Met、1.0%Lys/0.4%Met和Lys 1.2%/Met 0.4%。试验10天后,综合生长肉兔平均日采食量、平均日增重和健康状况,0.75%Lys/0.25%Met、0.75%Lys/0.5%Met、0.8%Lys/0.4%Met和1.0%Lys/0.4%Met效果较好,用来进行试验2。试验2:选用体重相近(1100±10g)的35日龄雄性肉兔160只,随机分为4组,每组40只。日粮中氨基酸含量为0.75%Lys/0.25%Met、0.75%Lys/0.5%Met、0.8%Lys/0.4%Met和1.0%Lys/0.4%Met。试验40天后结束试验,进行样品采集和数据统计。试验结果如下:1.生产性能及相关指标0.75%Lys/0.25%Met组生长肉兔平均日采食量最高,其次是0.75%Lys/0.5%Met和0.8%Lys/0.4%Met,1.0%Lys/0.4%Met平均日采食量最低(P<0.05)。但是0.8%Lys/0.4%Met和0.75%Lys/0.5%Met组生长肉兔平均日增重较高,且0.8%Lys/0.4%Met组显著高于0.75%Lys/0.25%Met和1.0%Lys/0.4%Met组(P<0.05)。与0.75%Lys/0.25%Met和1.0%Lys/0.4%Met组相比,日粮0.8%Lys/0.4%Met组显著降低了生长肉兔的料重比(P<0.05)。0.75%Lys/0.5%Met组生长肉兔死亡率最低,其次依次是1.0%Lys/0.4%Met、0.8%Lys/0.4%Met和0.75%Lys/0.25%Met,但是四个组死亡率差异不显著(P>0.05)。0.75%Lys/0.5%Met组、0.8%Lys/0.4%Met组与0.75%Lys/0.25%Met组、1.0%Lys/0.4%Met组相比宰前活重显著增加(P<0.05)。半净膛重、全净膛重在0.8%Lys/0.4%Met组中最高,并显著高于0.75%Lys/0.25%Met组、1.0%Lys/0.4%Met组(P<0.05)。0.75%Lys/0.5%Met组、0.8%Lys/0.4%Met组两组肾脏重量显著高于0.75%Lys/0.25%Met组和Lys1.0%/Met0.4%组(P<0.05),同样地,肾脏指数也是0.75%Lys/0.5%Met组最大,并显著大于0.75%Lys/0.25%Met组(P<0.05)。但是,0.75%Lys/0.25%Met组脾脏指数和圆小囊指数最大,与0.75%Lys/0.5%Met组、0.8%Lys/0.4%Met组相比,差异显著(P<0.05)。试验各组肉兔半净膛率、全净膛率、心脏重、心脏指数、肝脏重、肝脏指数、脾脏重、胸腺重、胸腺指数、圆小囊重、蚓突重、蚓突指数均无显著差异(P>0.05)。四个试验组生长肉兔肩脂肪、皮下脂肪、肾周脂肪和总脂肪重量无显著影响(P>0.05)。在四个试验组中,0.75%Lys/0.5%Met组生长肉兔肌肉滴水损失最大,0.75%Lys/0.25%Met组肌肉的剪切力最大(P<0.05)。四个试验组日粮不同Lys、Met配比对生长肉兔的肉色(a*、b*、l*)无显著影响(P>0.05)。与0.8%Lys/0.4%Met组相比,0.75%Lys/0.25%Met组生长肉兔被屠宰45 min后肌肉PH显著升高(P<0.05)。在肌肉组织中,四个组氨基酸转运载体SLC7A2、SLC7A5、SLC7A8基因表达无显著差异(P>0.05),与0.75%Lys/0.25%Met组相比,0.8%Lys/0.4%Met组显著上调了SLC7A10、和SLC38A2的表达(P<0.05),并且在四个组中表达量最高。同时,0.8%Lys/0.4%Met组MYOG与0.75%Lys/0.25%Met组相比表达量显著上调(P<0.05),Myf5表达量与其他三组相比表达量是最高的(P<0.05)。与其它三个试验组相比,0.8%Lys/0.4%Met组显著上调了P-m TOR蛋白的表达水平(P<0.05),Pm TOR/m TOR比值最大且与0.75%Lys/0.25%Met、1.0%Lys/0.4%Met组相比影响显著(P<0.05)。2.营养物质消化代谢方面四个试验组在食入氮无显著差异的情况下(P>0.05),0.8%Lys/0.4%Met显著提高了生长肉兔的沉积氮、氮利用率和氮生物学效价(P<0.05)。1.0%Lys/0.4%Met组生长肉兔与其他三个试验组相比,血浆中白介素(IL-1α)、IL-1β、IL-6和IL-8含量最高,且差异显著(P<0.05)。同时,血液生化指标白蛋白(AL)、总蛋白(TP)、尿素(UREA)、尿酸(UA)、葡萄糖(GLU)、总胆固醇(TCHO)和甘油三酯(TG)各个试验组间差异均不显著(P<0.05)。0.75%Lys/0.25%Met组生长肉兔氨基酸转运载体SLC7A8基因表达与0.8%Lys/0.4%Met、1.0%Lys/0.4%Met组相比显著上调(P<0.05)。0.8%Lys/0.4%Met组SLCA10基因表达最高与0.75%Lys/0.5%Met、1.0%Lys/0.4%Met组相比显著上调(P<0.05)。3.肠道屏障方面在小肠中,0.8%Lys/0.4%Met组生长肉兔小肠绒毛高度显著高于0.75%Lys/0.25%Met和1.0%Lys/0.4%Met组(P<0.05),但是小肠隐窝深度和绒隐比(绒毛高度/隐窝深度)四个试验组均无显著差异(P>0.05)。在四个试验组中,0.8%Lys/0.4%Met组肠道紧密连接蛋白1(ZO-1)、闭锁蛋白(Occludin)、封闭蛋白1(Claudin 1)、连接粘附因子2(JAM 2)、和连接粘附分子3(JAM 3)基因表达量最高,与0.75%Lys/0.25%Met组相比差异显著(P<0.05)。Claudin 2在0.75%Lys/0.5%Met组的表达量与0.75%Lys/0.25%Met和1.0%Lys/0.4%Met组相比显著上调(P<0.05)。试验四个组样本测序数据量合理,测序深度适宜(图14,a)。0.75%Lys/0.25%Met组共有1050个OTU,0.75%Lys/0.5%Met组共有1032个OTU,0.8%Lys/0.4%Met组共有1064个OTU,1.0%Lys/0.4%Met组共有1033个OTU。其中0.75%Lys/0.25%Met组特有的OTU为20个,0.75%Lys/0.5%Met组特有的OTU为15个,0.8%Lys/0.4%Met组特有的OTU为23个,1.0%Lys/0.4%Met组特有的OTU为16个。四个试验组共有的OTU数量为851个(图14,b)。筛选四个试验组门水平前8种优势物种:Firmicutes、Bacteroidota、Verrucomicrobiota、Patescibacteria、Desulfobacterota、Actinobacterota、unclassified_k_norank_d_Bacteria、Proteobacteria。0.75%Lys/0.25%Met组中Firmicutes、Bacteroidota、Verrucomicrobiota、Patescibacteria、Desulfobacterota、Actinobacterota、unclassified_k_norank_d_Bacteria、Proteobacteria分别占73%、14%、3.7%、3.2%、1.1%、1.9%、0.95%、0.13。0.75%Lys/0.5%Met组8种优势物种分别占74%、11%、8.3%、1.9%、1.8%、1.1%、0.75%、0.32%。0.8%Lys/0.4%Met组中分别占72%、14%、5.9%、1.7%、1.5%、0.66%、1.0%、1.9%。1.0%Lys/0.4%Met组中分别占73%、15%、4.6%、2.1%、1.6%、1.6%、0.63%、0.34%(图14,c)。4.经济效益Lys0.75%/Met0.50%组与0.75%Lys/0.25%Met组、0.8%Lys/0.4%Met组、Lys1.0%/Met0.4%组相比获得总利润金额和单只利润金额最大,分别为834.09元和20.85元。其次按利润金额由大到小分别是0.8%Lys/0.4%Met组803.09元和20.08元、Lys1.0%/Met0.4%组739.63元和18.49元、0.75%Lys/0.25%Met组537.17元和13.43元。综合上述试验结果,日粮添加0.8%Lys/0.4%Met时与其他试验组相比效果最优。日粮添加0.8%Lys/0.4%Met促进了生长肉兔的肠道和肌肉发育,提高了氮利用率、氮生物学效价、饲料转换率,同时,降低了机体炎症。试验说明生长肉兔日粮Lys、Met的适宜添加量/配比为0.8%和0.4%。