目的 探讨PHBV多孔材料作为软骨组织工程支架的可行性以及体内外培养方式对组织工程化软骨形成的影响。方法 采用“压片-热处理-粒子析出”技术制备PHBV多孔支架，体视镜及扫描电镜观察支架孔结构并测定孔隙率；通过MTT比色法检测7种浓度PHBV浸提液对L929小鼠成纤维细胞增殖的影响，以及扫描电镜观察L929细胞在PHBV支架上的生长情况，评价PHBV支架的细胞相容性，并用六级毒性分类法进行评级；应用酶消化技术从1日龄兔关节软骨提取软骨细胞并进行体外培养扩增，光镜下观察原代细胞及传代细胞形态变化和增殖速度，并绘制不同代次软骨细胞生长曲线；选择第3代软骨细胞制成密度为50×10~6／ml细胞悬液接种到PHBV支架进行体外培养，分别于3天、7天、14天取材，扫描电镜观察细胞在支架上的生长情况。将体外培养2周的细胞-支架复合物与单纯PHBV支架植入裸鼠皮下培养，4周、8周后取材，与体外培养2周、6周、10周的细胞-支架复合物同行大体观察、组织学染色以及Ⅱ型胶原免疫组化染色。结果PHBV支架孔径200μm～300μm，孔隙率80％左右，孔隙分布较均匀。PHBV浸提液对细胞增殖无显著影响，毒性评级为0级。扫描电镜示L929细胞在支架上黏附、增殖良好；连续镜下观察和细胞生长曲线表明，原代及前3代软骨细胞呈圆形或多角形，之后随着传代次数增加，细胞形态向梭形转变，出现“去分化现象”。前4代细胞以PHBv为支架构建组织工程化软骨中文提要增殖能力较原代强，之后细胞增殖能力减弱;扫描电镜观察示软骨细胞在PHBV支架上勃附、增殖良好并能分泌细胞外基质。大体观察及组织学染色表明体外及裸鼠皮下培养的细胞一支架复合物浅层均有新生软骨组织形成，支架外形保持良好。随着培养时间延长，软骨组织特征逐渐明显、糖胺多糖和胶原等基质含量逐渐增多，且皮下培养的软骨组织比同期体外培养的组织更为成熟，软骨基质更为丰富。免疫组化染色示体内外培养的软骨组织中H型胶原含量均较低且分布不均匀。单纯支架组无软骨组织形成。结论PHBV多孔材料具有适宜的孔结构和良好的细胞相容性，可作为软骨组织工程支架;裸鼠皮下培养较体外培养更利于组织工程化软骨的形成。