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目的 通过体内实验观察FTY720对大鼠急性脊髓损伤后神经功能的修复作用和血-脊髓屏障功能的影响,探讨相关的作用机制；同时初步观察FTY720-P对体外NSCs增殖、迁移和分化的影响,为后续实验和临床脊髓损伤治疗提供实验依据和新思路。方法 1.制备SD大鼠脊髓半横切损伤模型并随机分为四组：正常对照组(NG组)、假手术组(SO组)、损伤对照组(HS组)、芬戈莫德治疗组(FTY720组)。分别于损伤后1天、3天、7天、14天、28天对各组大鼠进行BBB运动功能评分、水平网格实验观察损伤侧后肢运动和放置功能；神经诱发电位实验观察损伤侧神经束传导功能；HE染色观察损伤周围组织病理形态变化以系统评价FTY720对神经功能修复作用的影响；最后通过伊文思蓝渗透性实验观察FTY720对大鼠脊髓损伤后血-脊髓屏障功能的影响,探讨其可能的作用机制。2.采用孕14.5-16.5天的SD大鼠胎鼠进行NSCs的体外分离培养,并利用细胞免疫荧光化学染色法对NSCs相关生物学特性进行鉴定；观察体外培养的NSCs在不同浓度的磷酸化形式FTY720-P(0nM、 1nM、10nM、100nM)作用下其增殖率、迁移能力及分化方向的改变。结果 1.半横切损伤后,HS组和FTY720组大鼠损伤侧脊髓神经功能下降,至28天时仍未恢复至NG组和SO组水平。行为学检测和神经电生理检测结果提示,FTY720组大鼠运动功能恢复速度比HS组更快；损伤7、14、28天时,两组大鼠BBB评分和SEP P1波潜伏期检测差异有统计学意义(P<0.05)；损伤14、28天时,两组大鼠水平网格检测和MEP Nl波潜伏期检测差异有统计学意义(P<0.05)。组织学检测结果显示,各时间点NG组和SO组大鼠脊髓结构均完整；损伤14天时,FTY720组脊髓损伤处慢性炎症细胞浸润,胶质化反应程度小于HS组；损伤28天时,FTY720组损伤处空洞残存面积小于HS组,再生纤维排列较HS组有序。2.血-脊髓屏障渗透性检测结果发现,损伤后7天内,HS组和FTY720组大鼠血-脊髓屏障EB渗出量较NG组和SO组明显增加；各时间点FTY720组EB渗出面积均小于HS组(P<0.05),其中损伤3天时差异最为显著。3.体外NSCs成功提取、分离培养并鉴定。4.在未添加bFGF的培养基中,不同浓度FTY720-P处理后的各组NSCs增殖率较对照组差异不明显。在添加有bFGF的培养基中,NSCs增殖率明显增加,其中10nM、100nM组细胞增殖率增加显著,与对照组比较有统计学差异(P<0.05)。5.利用细胞免疫荧光染色对体外诱导分化的NSCs行β-tublinⅢ和GFAP双标鉴定发现,1nM、10nM、100nM浓度的FTY720-P对β-tublinⅢ表达阳性的神经元和GFAP表达阳性的星型胶质细胞分化比例没有显著的影响。但在分化出的星型胶质细胞中,随着FTY720 -P浓度的增加,原浆型星型胶质细胞的比例上升。6.利用细胞小室迁移和结晶紫染色实验观察FTY720-P对NSCs迁移能力的影响发现,随FTY720-P浓度增加,NSCs迁移数量增加,10nM、100nM组NSCs迁移数量增加明显,与对照组比较差异显著(P<0.05)。结论 FTY720能显著减少脊髓损伤后急性期血-脊髓屏障渗透性,有效促进急性期后神经功能的恢复；体外实验证实FTY720-P在一定剂量下能与bFGF协同作用,促进NSCs增殖；对NSCs产生化学趋化作用,促进NSCs的迁移；同时,FTY720-P还能影响分化方向,提高分化胶质细胞中原浆型星型胶质细胞的比例。证实FTY720-P能对体外NSCs生物学特性有一定调节作用。