MiRNA-206参与甲状腺功能亢进症患者代谢异常的机制研究

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目的:探讨甲状腺功能亢进症(甲亢)患者体内循环微小核糖核酸-206(micro RNA-206,mi R-206)的表达变化及其参与甲状腺激素(thyroid hormone,TH)调节脂代谢的相关机制。方法:按照纳入和排除标准收集2013年10月~2014年03月来自我院20-60岁15例内分泌科门诊的甲亢患者和12例体检中心的健康者血清标本,采用实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time Polymerase Chain Reaction,q RT-PCR)技术检测血清标本中mi R-206表达水平的变化并利用线性回归分析其与游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)、游离四碘甲状腺原氨酸(free tetraiodothyronine,FT4)、促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)相关性;另外以肝癌细胞株(Hep G2细胞)为工具,在其培养基内添加三碘甲状腺原氨酸(triiodothyronine,T3)干预,采用q RT-PCR技术检测细胞内mi R-206表达水平变化,并分别在生化分析仪上采用酶偶联比色法检测细胞内甘油三酯(triglycerides,TG)含量变化和利用油红进行染色;在细胞过表达/沉默mi R-206后,采用酶偶联比色法检检测细胞内TG含量的变化;在T3干预过表达mi R-206的细胞后,采用酶偶联比色法检检测细胞内TG含量的变化,观察T3对过表达mi R-206细胞内TG含量的变化。结果:1.q RT-PCR技术检测结果表明:甲亢患者血清内mi R-206的表达水平明显低于健康者(p<0.05)且血清内mi R-206水平与FT3浓度呈负相关(r=﹣0.408,p=0.035),与FT4浓度呈负相关(r=﹣0.451,p=0.018),与TSH浓度呈正相关(r=0.445,p=0.020);2.采用T3分别干预Hep G2细胞24h、36h后,细胞内mi R-206表达水平均明显降低(p<0.05);3.采用T3分别干预Hep G2细胞12h、24h、36h后,TG含量均明显降低(p<0.01);4.沉默/过表达mi R-206后,细胞内TG含量显著性降低/升高(p<0.05);5.用T3干预过表达mi R-206和阴性对照(negative control,NC)的Hep G2细胞,过表达mi R-206细胞内TG含量显著性高于NC,说明过表达mi R-206具有拮抗T3降低TG生成的作用(p<0.05)。结论:1.甲亢患者血清mi R-206含量显著降低;2.人血清mi R-206含量与TH浓度呈负相关关系;3.Mi R-206对Hep G2细胞TG代谢具有调控作用;4.Mi R-206可能参与甲亢患者体内T3对TG代谢的调节过程。
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