背景与目的:食管癌是我国乃至世界上最常见的六大恶性肿瘤之一,具有发病率高、死亡率高的特点,我国食管癌占全世界每年新发病例的一半,因而仍是我国重点防治的恶性肿瘤之一。食管上皮癌变具有多阶段、进行性演进的特点,其变化经历正常粘膜→基底细胞过度增生→不典型增生→原位癌→浸润癌的过程,并具有双向不稳定性发展的特性。食管癌发病机制仍不明确,缺乏准确有效的早期诊断方法是造成食管癌高死亡率的主要原因。目前手术切除仍是治疗食管癌的主要手段。但患者预后不良,5年生存率仅为10%左右。因此深入了解食管癌发生、发展和侵袭的机制,制订预测、早期诊断和早期阻断的有效措施,对于降低患者死亡率、延长生存时间均有重要的意义。食管癌癌变过程涉及多种癌基因的激活与抑癌基因的失活,其中上皮钙粘素E-cadherin即是其中之一。上皮钙粘素E-cadherin,是一类主要介导同质细胞间粘附的钙依赖性跨膜糖蛋白。大量研究表明E-cadherin表达水平与肿瘤发生的关系。近年来诸多研究业已证实,该蛋白是Wnt信号途径上的关键因子,参与该途径的肿瘤促进作用,以β-catenin和TCF-4核移位为标志的Wnt信号通路与E-cadherin失活等均存在交互作用。目前公认,细胞粘附功能的丧失是导致肿瘤细胞侵袭和转移的前提条件之一,故E-cadherin被广泛认为是肿瘤进展的关键蛋白。当E-cadherin表达降低,尤其是功能性的膜表面的E-cadherin表达下调或功能障碍时,细胞间的粘附能力就会下降,肿瘤细胞则彼此松动、分离,进而自原发灶脱落,逐步浸润深层、并向局部淋巴结及远处转移。因此,E-cadherin表达下降与肿瘤的侵袭和进展密切相关。对诸多肿瘤的研究可见,E-cadherin表达失调伴随着肿瘤细胞的去分化,极性消失,浸润能力增强以及淋巴结转移率增高,且预示患者预后不良。上述结果在胃癌、膀胱癌、前列腺癌和乳腺癌中均已得到证实,即E-cadherin正常表达的罹癌患者的预后要优于那些E-cadherin表达下调的病人。这提示,E-cadherin表达失调可作为肿瘤恶性程度以及患者预后预测的生物标志物和早期诊断的重要候选分子指标。但E-cadherin与食管癌的相关性研究并不多见。本课题以癌旁相对正常食管上皮、癌前病变组织、食管癌标本为研究对象,通过高通量组织芯片技术,制作石蜡组织微阵列,运用免疫组织化学ABC方法,检测E-cadherin在上述组织中的表达情况和分布特点,分析该基因的表达与食管癌各病理特征之间的关系,探求E-cadherin在食管癌不同病变组织中表达的生物学意义,以期为食管癌的早期诊断、预后评价和基因治疗指标的筛选等提供有价值的实验依据。材料与方法食管癌癌旁、癌前与癌组织均选自鞍山市肿瘤医院1999~2008未经化放疗的诊断明确的食管癌手术切除标本。本研究采用石蜡组织微阵列技术,运用免疫组织化学(IHC)方法,对E-cadherin在食管粘膜非癌组织、癌前组织、食管癌中的表达情况和分布特点进行检测,分析该基因的表达与食管癌侵袭与转移的关系。实验数据采用SPSS11.0软件包,应用Kruskal-Wallis和Mamm Whitney的检验方法,对各因子在不同病变胃组织中的分布进行统计学差异分析。结果1.食管癌发病的性别、组织类型及年龄分析本研究中的83例食管癌样本,鳞癌68例,占81.2%,腺癌15例,占18.8%,男性患者为72例,占84.3%,女性患者为13例,占15.7%,显示本食管癌病例样本群中男性发病率远高于女性。其中68例鳞癌病例中,男性为63例,女性仅5例,但在15例腺癌中,男性为7例,女性则有8例,统计学分析显示鳞癌与腺癌的罹患具有显著的性别差异(p=0.000),但未见年龄之间的差异(p=0.067)。2. E-cadherin在不同病变食管组织中的表达/分布特点E-cadherin的下调率在癌旁相对正常组织、癌前病变和食管癌组织中,呈现逐渐升高的趋势,下调率分别为44.4%、84.2%和94.0%,统计学分析显示,随着病变进展,E-cadherin蛋白的下调增加。两组间比较可见,食管癌组同癌旁正常组和癌前病变组相比较,具有显著的统计学差异(p=0.000,p=0.006),在食管癌不同组织病理分型之间,该蛋白的阳性率在鳞癌较高,两者具有统计学差异(p=0.001)。在食管癌癌旁正常组和癌前病变组相比较的统计学分析呈现表达的差异(p=0.002)。3. E-cadherin的表达与肿瘤各病理指标之间关系E-cadherin表达的下调率在男性,为95.7%,女性为84.6%,统计学分析显示,未见性别差异(p=0.125)。不同年龄组E-cadherin表达情况的分析显示,两者未见显著性差异(p=0.196)。在不同食管癌高、中、低分化的比较中,E-cadherin表达的下调率分别为88.9%、97.5%和93.7%,统计学分析显示p=0.352,三者间无统计学差异。食管癌不同大、中、小病变中E-cadherin表达的下调率分别为75.0%、96.5%和100%,具有统计学差异(p=0.011)。本研究所观察的83例食管癌中,39例未见淋巴结转移(LN-),E-cadherin蛋白下调者34例(87.2%);44例有淋巴结转移(LN+)的样本中,全部表现为E-cadherin减少或消失,淋巴结转移组E-cadherin下调率显著高于无淋巴结转移组(p=0.015)。E-cadherin的表达上调在T3,4 (98.3%)中明显高于T1,2 (84%),但两者之间尚无统计学意义的差异存在(p=0.013)。E-cadherin的下调表达在III-IV期(100%)食管癌中明显高于I-II期(88.4%),具有统计学差异存在(p=0.027)。结论1.食管癌中鳞癌为主要的病理类型,男性多发。腺癌所占比例较低,但女性腺癌发病率高于男性。2. E-cadherin基因表达是食管癌发生、发展、演进过程中重要的分子事件,其表达在癌旁相对正常食管粘膜组织、癌前病变、食管癌组织中呈现逐渐下调的表达特点。3. E-cadherin基因表达未见年龄与性别的差异,但与分化程度和病变大小有关,分化越低、病变越大则E-cadherin下调表达越显著。4. E-cadherin下调率在淋巴结转移组显著高于无淋巴结转移组;在T3,4组中显著高于T1,2组;在III-IV期食管癌中显著高于I-II期,这说明该基因的表达与食管癌细胞进展相关,可以作为判断食管癌病变程度以及预测肿瘤浸润趋势的潜在的分子指标,具有重要的肿瘤诊断学意义。