利用SET-LRP和点击化学对聚合物膜表面修饰和多肽功能化及其生物医用研究

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合成聚阳离子是一类理想的抗菌材料,因为它们类似于天然抗菌肽,但是此类材料的血液相容性依然面着临挑战。在本论文中,利用2-(叔丁基-氨乙基)甲基丙烯酸酯(TBAEMA)合成了均聚物;以及采用单电子转移自由基聚合反应(SET-LRP),利用聚乙二醇甲基丙烯酸酯(PEGMA,Mn=360Da)制备出聚乙二醇化的无规和嵌段共聚物。然后,利用碘代甲烷和溴己烷将前体聚合物中的仲胺基进行季铵化,得到了3个系列的季铵化聚合物。采用大肠杆菌方法对这些季铵化聚合物抗菌性能进行了评价,结果表明,最小抑菌浓度MICs,32-200mg/L;无规共聚与两嵌段共聚物相比,前者具有较高的MICs值。另外,还将这些阳离子聚合物接枝到聚碳酸酯聚氨酯(PCU)膜表面,发现改性膜表现出良好的抗大肠杆菌效果。此外,利用人血红细胞对这些这些材料的溶血性能进行了研究,结果发现,除季铵化的均聚物表现出最高的溶血性能之外,其他的两亲性聚阳离子只表现出很低的溶血反应。因此,本文设计的材料具有结构和功能可控性和价格低廉的优点,在生物医药和可植入材料领域具有应用价值。此外,通过硫醇-烯点击化学和交联反应,制备了PCU和两性离子聚降冰片烯为基础的弹性交联膜,用它作为细胞生长支架材料。首先,通过光引发硫醇-烯点击反应,通过半胱氨酸和聚降冰片烯的双键反应,将聚降冰片烯胺化;之后,以六亚甲基二异氰酸酯作为交联剂,控制其与PCU溶液反应。与空白膜相比,改性膜的拉伸强度(14-20MPa)和初始模量(8-14MPa)与空白膜的拉伸强度(12±4MPa)和初始模量(3±1)相比,得到大大提高。除了最高两性离子聚合物含量为28%膜,其断裂伸长率为b470±80%之外,包括空白膜在内的所有膜都表现出较高断裂伸长率(b740-900%)。5周的PBS降解实验表明,与空白PCU膜相比,改性材料的生物降解性能大大提高。采用上述反应条件,也可以利用L-半胱氨酸和β-巯基乙醇作为硫醇试剂,对PCU空白膜进行改性。利用MTT实验对改性材料细胞相容性进行了表征,采用EA.hy926细胞作为生长和增殖模型,1天、3天和7天的增殖结果表明,这些材料具有很好的生物相容性。本工作的主要特色是合成路线方便和材料独特。另外,在PCU弹性膜表面进行特定修饰,以便促进快速内皮化,同时抑制平滑肌和血小板吸附。首先,PCU表面接枝亲水性刷状聚合物,通过SET-LRP反应接枝PEGMA,随后再次通过SET-LRP反应,接枝甲基丙烯酸五氟苯酯(PFMA)活性单体,形成嵌段和接枝结构。烯丙胺与PPFMA经光引发聚合后改性,利用光引发硫醇-烯点击化学反应,得到短肽序列Cys-Ala-Gly,(CAG)功能化膜。对改性膜进行XPS和水接触角测定表征,CAG固定化浓度有效地提高到10-19pm/cm2。与全血接触时,不同功能化表面能够抑制血小板吸附。改性材料对内皮细胞和平滑肌细胞的粘附实验,考察了1,3和7天,结果表明采用方法简便易行,改性表面具有锚定内皮细胞的靶向配体,所构建膜能够促进快速内皮化,具有作为组织工程应用的前景。
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