MT-12抑制膀胱癌细胞侵袭转移的分子机制研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:daregooo
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[目的]应用MT-12作用于膀胱癌细胞后,检测细胞侵袭转移相关因子的表达情况,探究MT-12抑制膀胱癌细胞侵袭、转移作用的分子机制。[方法]1、应用不同浓度MT-12对膀胱癌细胞T24和RT4进行处理;再用促瘤剂佛波酯PMA对膀胱癌细胞干预:分为对照组、PMA和PMA+MT-12三组;2、应用明胶酶谱检测不同浓度MT-12及PMA干预下MMP-2和MMP-9在T24和RT4细胞上清液中的活性;3、应用ELISA实验检测不同浓度MT-12及PMA干预下VEGF在T24和RT4细胞上清液中表达情况;4、应用qRT-PCR分别检测转移相关的因子ICAM-1、VCAM-1及VEGF在不同浓度MT-12及PMA干预下的mRNA的表达情况;5、应用Western Blot检测NF-κB及EGFR/PI3K/Akt信号通路中相关分子在MT-12处理下的蛋白表达水平。[结果]1、检测MMP家族的表达变化,结果显示不同浓度MT-12作用后,MMP-9的活性显著下调,MMP-2活性未见明显变化;MT-12能够有效抑制PMA诱导的MMP-9的上调,但对MMP-2的活性无显著影响。2、对膀胱癌细胞中的VEGF进行了检测,ELISA和qRT-PCR结果显示PMA促进了膀胱癌细胞的分泌,而MT-12抑制了 VEGF的表达。3、检测相关的粘附因子ICAM-1和VCAM-1,qRT-PCR结果显示不同浓度MT-12作用后,ICAM-1的表达明显减少,而VCAM-1的表达无影响;PMA明显上调了 ICAM-1的水平,而VCAM-1的水平无变化,MT-12能够抑制ICAM-1的上调,同样对于VCAM-1的表达无影响。4、Western Blot结果显示:MT-12能够抑制磷酸化NF-κB p65的激活,但是并非通过影响EGFR/PI3K/Akt信号通路所实现。[结论]MT-12能够在体外通过NF-κB信号通路抑制膀胱癌侵袭与转移相关因子MMP-9、VEGF、ICAM-1的活性或表达,来达到抑制膀胱癌细胞打开内皮细胞间隙的能力。
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