背景和目的:急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)是我国白血病最常见的类型,发病率约十万分之四,并随着年龄的增长发病率逐年上升。该病以骨髓、外周血和其他器官中出现大量未成熟的髓系前体细胞,这些髓系前体细胞以增殖失控、分化障碍、凋亡受阻为主要的生物学特征,从多个角度抑制正常的造血分化过程,最终导致贫血、出血、感染等临床表现并最终致死。由于AML的临床异质性,导致不同的AML病人预后各不相同,目前通常采用细胞遗传学的方法预测AML的预后,但发现很多细胞遗传学预后指标相同的病人的预后仍差异很大,因此这一指标远不能满足临床预后精准化判断的需要,因此非常有必要寻找新的具有预后意义的分子标记物。蛋白质翻译后类泛素化修饰(small ubiquitin like modifier,SUMO)是由于其修饰过程简洁而功能广泛受到关注。SUMO化修饰是动态可逆的过程,而SENP1(SUMO specific proteinase 1)是作用最强的去SUMO化修饰蛋白酶。前期研究表明SENP1参与红细胞、T细胞和B细胞的发育过程,提示SENP1在造血系统细胞的分化发育过程中有着关键的作用。但SENP1在AML中的表达水平、生物学作用、机制以及在AML病人中的预后意义目前都是未知的。为了进行以上未知领域的探索,本研究共分三部分进行。第一部分通过RT-PCR、免疫组化和蛋白免疫印迹检测SENP1在AML中的表达情况;通过构建敲低SENP1的AML稳转细胞系,观察SENP1对AML细胞增殖和凋亡的影响;应用Kaplan-Meier分析和相关性分析,研究SENP1对于AML预后判断的意义,并研究其与其他报道的预后分子(CD56,CD11b)之间的相关性。第二部分研究HOXA9的SUMO化修饰对AML生物学特征的影响和ZNF521的SUMO化修饰对AML生物学特征的影响,以解释SENP1影响AML生物学特征的可能机制。第三部分采用meta分析的方法明确CD56和CD11b对于AML的预后意义,为解释SENP1的预后作用提供线索。材料与方法:整个研究采用了标本实验、细胞实验、动物实验、临床资料分析等多种手段。标本实验以前期收集的AML病例标本和增生性骨髓象对照标本为主要的研究对象。细胞实验以常用的代表性AML细胞系(如THP-1,K562,U937)为主要的研究对象。动物实验采用nod/scid小鼠构建aml的模型。临床资料分析主要以公共数据库的资料作为研究对象。1.分别用rt-pcr、免疫组化和蛋白免疫印迹检测senp1蛋白和mrna在aml中的表达情况。2.应用shrna技术构建敲低senp1的aml稳转细胞系,观察senp1对aml细胞增殖和凋亡的影响;采用rna-seq的方法寻找senp1可能的下游基因。3.应用kaplan-meier分析和相关性分析,研究senp1对于aml预后判断的意义,并研究其与其他报道的预后分子(cd56,cd11b)之间的相关性。4.通过免疫共沉淀、点突变、构建稳转细胞系等技术,研究hoxa9和znf521的sumo化修饰对aml生物学特征的影响,以期解释senp1发挥调控aml生物学特征作用的可能机制。5.通过meta分析的方法明确与senp1的表达存在显著相关性的预后分子cd56和cd11b的预后意义,为解释senp1的预后作用提供线索。结果:1.senp1蛋白和mrna在aml中均高表达。2.敲低senp1后,aml细胞系的增殖能力减低、凋亡比例上升。3.senp1高表达与aml病人的不良预后相关,并且senp1和目前已报道的预后分子cd56和cd11b之间存在显著相关性。4.hoxa9能够发生sumo化修饰,并且sumo化修饰缺失(位点突变)后hoxa9的促增殖能力更强。hoxa9的sumo化修饰受到senp1的调控。5.znf521能够发生sumo化修饰,并且sumo化修饰缺失(位点突变)后znf521的促增殖能力更强。znf521的sumo化修饰受到senp1的调控6.通过meta分析的方法明确与senp1表达密切相关的cd56和cd11b都是aml的预后预测分子。结论:1.senp1在aml中高表达,具有促进aml细胞增殖、抑制凋亡的能力。2.senp1对aml生物学特征的影响可能是通过调控hoxa9和znf521的sumo化修饰来实现的。3.与senp1表达密切相关的cd56和cd11b都是aml的预后预测分子,为解释senp1的预后预测作用提供了线索。