应用SELDI-TOF-MS技术对大鼠急性脊髓损伤后脑脊液蛋白组学的研究

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目的:大剂量静脉使用甲基强的松龙(Methyprednisolone MP)可通过多种机制阻止脊髓继发性损伤的发生,且是目前被明确肯定疗效的药物。但因其应用后的大量副作用而逐渐受到质疑,加之伤后8h内时间窗的严格限制,致使63%的患者得不到有效治愈。因此,我们改变给药途径,通过蛛网膜下腔即鞘内注射MP,应用SELDI-TOF-MS技术分析大鼠急性脊髓损伤后脑脊液不同时间点差异性蛋白质谱,寻找脑脊液中明显变化的差异蛋白,筛选出敏感特异的生物标志物,以进一步探讨急性脊髓损伤后的修复机制,为ASCI治疗寻找新的思路及提供白组学方面实验理论依据。方法:采用60只SD雄性大鼠,随机分成2组:大剂量甲基强的松龙(MP)治疗组(A组n=30)、小剂量甲基强的松龙(MP)治疗组(B组n=30)。采用Allen’s法制作SD大鼠急性脊髓损伤模型,脊髓损伤后行鞘内注射MP::大剂量MP(0.075mg/100g)、小剂量MP(0.001mg/100g),分别于3h、6h、8h、12h提无菌取脑脊液,采用SELDI-TOF-MS技术检测A组、B组脑脊液中差异表达的蛋白质,获得脑脊液中的蛋白质谱,用ZUCI-PDAS软件包分析,筛选出各组之间的差异蛋白质。结果:应用SELDI技术对脑脊液中的差异蛋白质点进行鉴定,共收集到36个蛋白质波峰其质/荷比(ratio of mass to change, M/Z)在1000~20000之间被标记,A组、B组之间比较得出4个显著差异的蛋白质峰。结论:SELDI-TOF-MS是一种新的蛋白质组学技术,能够检测样本中大量的低分子量蛋白质,具有快速、简便易行且高通量的特点。本研究应用此技术对大鼠急性脊髓损伤后脑脊液蛋白质谱分析,发现A组与B组脑脊液蛋白质存在显著差异。
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