目的探讨褐藻胶寡糖（AOS）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的衰老心肌细胞的影响与自噬的关系及其可能的机制。方法实验选用H9c2大鼠心肌细胞系。实验分六组:对照（Control）组、模型（H₂O₂）组、褐藻胶寡糖低剂量（H₂O₂+AOS（L））组、褐藻胶寡糖中剂量（H₂O₂+AOS（M））组、褐藻胶寡糖高剂量（H₂O₂+AOS（H））组及AMPK抑制剂Compound C（H₂O₂+AOS（H）+Cpd C）组。对照组仅给予同步换液处理,其余各组细胞用H₂O₂（100μmol/L）干预4 h诱导H9c2心肌细胞衰老模型。造模后H₂O₂+AOS（L）组、H₂O₂+AOS（M）组和H₂O₂+AOS（H）组分别给予不同浓度的AOS（10μg/mL、50μg/mL、100μg/mL）干预衰老心肌细胞,H₂O₂+AOS（H）+Cpd C组用AMPK抑制剂Compound C预处理衰老心肌细胞2 h后给予高剂量AOS（100μg/mL）进行干预。AOS干预48 h后,应用衰老相关性β-半乳糖苷酶（Senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal）染色法检测衰老细胞数目;流式细胞术检测细胞周期;Western blot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、beclin1、AMPK、p-AMPK、mTOR和p-mTOR的表达;RT-PCR检测LC3-Ⅱ和p62 mRNA的表达。结果1.β-半乳糖苷酶染色显示:与Control组相比,H₂O₂组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数明显增加,差异有统计学意义（p<0.05）;与H₂O₂组相比,AOS干预后使β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数呈剂量依赖性减少,差异均有统计学意义（p<0.05）;AMPK抑制剂Compound C预处理细胞2 h,抑制了AOS延缓心肌细胞衰老的作用,与H₂O₂+AOS（H）组相比,差异有统计学意义（p<0.05）。2.细胞周期检测结果显示:与Control组相比,H₂O₂导致细胞周期阻滞,G1期细胞增多,G2期细胞减少,差异均有显著性（p<0.05）;与H₂O₂组相比,AOS呈剂量依赖性的缓解了H₂O₂引起的细胞周期阻滞,G1期细胞减少,G2期细胞明显增多,差异均有显著性（p<0.05）;Compound C预处理细胞2 h,显著抑制了AOS的作用（p<0.05）。各组心肌细胞S期细胞所占比例无显著差异（p>0.05）。3.Western blot结果显示:与Control组相比,H₂O₂组心肌细胞自噬标志性蛋白LC3-Ⅱ和beclin1表达明显降低,差异均有统计学意义（p<0.05）;与H₂O₂组相比,AOS干预后使衰老心肌细胞LC3-Ⅱ和beclin1蛋白表达显著上调（p<0.05）;Compound C预处理细胞2 h,抑制了AOS激活自噬的作用（p<0.05）。4.Western blot结果显示:与Control组相比,H₂O₂组心肌细胞p-AMPK蛋白表达明显减少,p-mTOR表达明显增加,差异均具有显著性（p<0.05）;与H₂O₂组比较,AOS干预后使衰老心肌细胞p-AMPK蛋白表达明显增加,p-mTOR表达减少,差异均具有显著性（p<0.05）;Compound C预处理细胞2 h,显著抑制了AOS对AMPK/mTOR通路的激活（p<0.05）。5.RT-PCR结果显示:与Control组比较,H₂O₂组心肌细胞LC3-ⅡmRNA表达明显减少,p62 mRNA的表达显著增多,差异均具有显著性（p<0.05）;与H₂O₂组比较,AOS干预后使衰老心肌细胞LC3-ⅡmRNA表达明显增加,p62 mRNA表达减少,差异均具有显著性（p<0.05）;Compound C预处理细胞2 h,抑制了AOS的作用（p<0.05）。结论AOS通过上调衰老心肌细胞自噬水平延缓H₂O₂诱导的H9c2心肌细胞衰老,其作用机制可能与AMPK/mTOR信号通路的激活有关。