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猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)是危害中国乃至全球养殖业最重要的病原之一，主要特征为母猪繁殖障碍和仔猪呼吸困难，对养猪业造成巨大的经济损失。PRRSV的非结构蛋白nsp2在其复制和致病过程中起着重要的作用，也是PRRSV潜在的毒力相关因子。前期我们的研究发现nsp2在细胞中表达产生蛋白质聚集体（aggresomes），14-3-3ε蛋白在aggresomes形成过程中起到了重要作用。在正常细胞中蛋白aggresomes的形成通常会激活aggresomes-自噬途径，但对于病毒蛋白诱导形成的aggresomes是否也会激活这个途径还未知。 为了进一步研究nsp2表达诱导形成aggresomes的机制及其在PRRSV感染过程中的作用，通过设计14-3-3ε蛋白siRNA对特定亚型进行基因沉默，用western blot和RT-PCR观察14-3-3ε对PRRSV感染的影响，结果发现14-3-3ε的敲低会明显的降低PRRSV的感染，降低比例达70%。将分别带有nsp2四个结构域即半胱氨酸蛋白酶结构区（OTU）)、中心高变区（HV）、C端的跨膜区（TM）和尾巴区（Tail）的重组质粒转染293T细胞，免疫共沉淀技术分析发现14-3-3ε与nsp2的Tail区域相互作用。将克隆入不同真核表达载体的nsp2转染细胞，Western blot分析发现nsp2的表达可以促进LC3-Ⅱ升高，同时降低P62的表达，将转染表达nsp2的细胞制作超薄切片，在透射电子显微镜下，可观察到双层膜结构的自噬小体。这些结果表明nsp2的表达可诱导细胞自噬，由此推断nsp2表达形成的aggresomes激活了aggresomes-自噬途径。为研究该途径的作用机制，将nsp2转染细胞，通过免疫共沉淀技术发现nsp2与自噬受体P62具有相互作用，进一步的分析表明其作用区域位于nsp2的TM和Tail区域。本研究的结果表明，nsp2表达形成的aggresomes，可激活aggresomes-自噬途径，该过程通过P62与nsp2的TM和Tail区域相互作用完成的，并且还发现14-3-3ε通过nsp2的Tail区参与自噬的调控。本研究为进一步研究PRRSV致病机制奠定基础，同时将参与aggresomes-自噬的细胞蛋白作为抗PRRSV感染的靶细胞蛋白的可行性提供重要的技术支持。