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目的:阿司匹林作为一种有效的抗血小板药物,已广泛应用于心肌梗死、脑卒中等多种心血管疾病的预防和治疗,但在盐敏感性高血压中的作用目前仍不清楚。盐敏感性高血压发病机制复杂,与肾脏排钠障碍、交感神经兴奋性增加以及免疫系统异常等相关。最新研究发现,血小板异常活化能够通过诱导炎症反应参与内皮功能损伤、血管硬化和血管炎症等血管病变,可能促进盐敏感性高血压的发生发展。临床研究也发现,盐敏感性高血压患者体内血小板活性增强。本研究旨在探讨阿司匹林是否能够通过抑制血小板异常活化参与盐敏感性高血压的发生发展,并探讨阿司匹林的作用机制,以期为盐敏感性高血压及其靶器官损伤的防治提供新的理论依据和治疗靶点。方法:在体实验:SPF级雄性盐敏感性高血压大鼠(Dahl salt-sensitive rat,,DSS)及其对照血压盐耐受性大鼠(SS-13BN)分别以正常盐(Normalsalt,NS,0.4%NaCl)、高盐(High salt,HS,8%NaCl)以及高盐合并阿司匹林(High salt+Aspirin,HS+ASA,10mg/kg/d)喂养8周,期间采用尾袖法连续测量血压(3次/周),实验结束后采用颈总动脉插管校正大鼠动脉血压(Blood pressure,BP);流式细胞术检测外周血中血小板的活化率、白细胞-血小板聚集率、以及白细胞浸润血管的百分率;尾血测定实验以及血小板胶原静态黏附实验检测血小板活化情况;免疫组化和HE染色检测肾脏白细胞浸润情况以及肾脏病理结构改变;使用Power-lab系统进行乙酰胆碱(Acetylcholine,Ach)依赖的血管收缩以及舒张功能的检测;Western blot检测血管功能相关性蛋白eNOS、iNOS、vWF、ET-1的表达以及肾脏炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血清中可溶性血栓素TXA2的表达量情况;Real-time PCR检测IL-6、IL-1β、TNF-α的表达量以及血小板中COX-1、COX-2的mRNA的表达;利用蛋白组学分析的方法检测不同的饮食处理对DSS大鼠血小板蛋白表达的影响。细胞实验:体外分离并富集大鼠的外周血白细胞以及血小板,使用荧光染料BCF-AM对白细胞进行染色,分别用阿司匹林、COX-1抑制剂、COX-2抑制剂对血小板进行预处理,将染色的白细胞和预处理过的血小板分别与正常盐(133 mM NaCl)、高盐(173 mM NaCl)环境的下肺微血管内皮细胞(PMVEC)共孵育,通过荧光倒置显微镜观察白细胞和内皮细胞的黏附情况。结果:DSS大鼠经高盐喂养之后,血压较正常盐组显著升高,阿司匹林干预之后血压与高盐组相比显著降低(P<0.05),而SS-13BN大鼠在不同处理(正常盐、高盐、高盐加阿司匹林)下血压无明显变化;流式细胞结果显示,高盐组DSS大鼠外周血的血小板活化率显著增加,白细胞与血小板聚集率较对照组显著增加,阿司匹林灌胃之后,血小板的活化以及与白细胞的聚集率恢复至对照组水平(P<0.05);免疫组化结果显示,高盐饮食增加了肾脏白细胞的浸润,阿司匹林干预能够显著改善上述情况;血管功能检测结果显示,高盐饮食之后,DSS大鼠血管收缩和舒张功能明显减弱,而阿司匹林处理之后能够有效改善血管功能(P<0.05);流式结果显示高盐组较正常盐相比,DSS大鼠血管白细胞浸润增加,蛋白印迹结果显示血管vWF、ET-1、iNOS表达量显著增加、血管eNOS表达量明显减少,高盐加阿司匹林组较高盐组相比能够有效降低血管白细胞浸润,抑制血管vWF、ET-1、iNOS表达量的增加,能够使eNOS的表达恢复正常。Real-time PCR结果显示,高盐组DSS大鼠较正常盐组DSS大鼠肾脏炎症因子表达水平显著升高,阿司匹林处理之后能够降低高盐引起的炎症因子的升高。蛋白组学结果显示高盐饮食激活了血小板内的凝血和补体途径,而高盐的同时给予阿司匹林干预,能够有效抑制DSS大鼠血小板内的凝血补体途径的激活,从而抑制血小板的活化和功能。结论:低剂量阿司匹林可通过抑制血小板内COX-1的活性以及补体凝血途径的激活,抑制血小板活化,减少外周血中血小板和白细胞的聚集,减少炎症细胞向肾脏及血管组织的浸润,减轻肾脏炎症反应及血管内皮功能障碍,进一步改善DSS大鼠由高盐饮食诱导的盐敏感性高血压的发生与发展。