中医藏象学说是中医理论体系的核心内容,它是中医理法方药的基础。中医五脏的功能,不仅有解剖生理功能,还有调控功能,其调控功能不仅对机体本身进行调节,还对自然界的变化起着协调共振的适应性调节作用。因而“天人相应”的人体内外整体调控观是中医藏象的特色所在,但目前对中医藏象的时空特性的研究还不多,故取得的成果也仍不十分尽人意。在此情况下,本课题试从时间生物学的角度,运用“以时测藏”的思路对中医藏象本质进行研究,为中医揭示藏象本质的研究开辟了一条新的道路。1.目的:本课题以“肾应冬”为切入点,结合松果腺、褪黑素等现代时间生物学的研究成果,从神经内分泌实验角度对“肾应冬”生理机制的内涵进行揭示,为“五脏主时”理论提供科学实验依据。2.方法:2.1理论研究:采用文献学、逻辑分析等方法,进行下面几个方面的研究:2.1.1整理五脏应时理论的学术渊源,理清其发展脉络,探讨其哲学基础,分析该理论的特点和不足之处并阐述其在中医学理论研究及临床诊疗方面的价值。2.1.2探讨用现代科学发展的一些理论成果,如控制论、系统论、时间环境医学、神经-内分泌-免疫网络理论和细胞信号转导等理论来研究五脏应时理论的可行性。为中医藏象实质现代研究探索出新的途径。2.1.3结合前期的实验结果对该实验研究的切入点进行阐释和分析,说明本实验选择甲状腺轴和对松果腺为切入点来研究“肾应冬”生理机制的原因,并解释该实验的可行性。2.2实验研究:2.2.1总体设计:本研究主要以与“肾应冬,主骨”相关的甲状腺轴和对光节律极为敏感的神经内分泌高位调节器——松果腺为切入点,观察在生理状态下,健康成年人的褪黑素、甲状腺激素以及骨代谢水平是否存在季节性变化,从时间生物学的角度对“肾应冬”生理机制的内涵进行揭示,希冀为“五脏主时”理论提供科学实验依据。2.2.2实验对象:本实验是人体实验,以22-25岁的北京中医药大学在校生40人为研究对象,经询问确定这40例研究对象肝肾功能正常、未患内分泌疾病及影响骨矿代谢的疾病,所有受试者均在普通饮食条件下(无高钙、高磷)于夏至日和冬至日清晨空腹采取静脉血10.0mL进行指标检测。2.2.3实验指标检测方法:血清褪黑素(MT)测定采用本研究室研发的I125标记放射免疫试剂盒检测;血TRH、TSH、T3、T4、血骨钙素(BGP)采用放射免疫法;骨碱性磷酸酶(BALP)、I型前胶原羧基肽采用(CICP)酶联免疫(ELISA)法。2.2.4实验结果统计分析方法:所有数据以±s表示,组间差异利用SPSS10.0统计软件包进行ANOVA检验,以P<0.05差异有显著性。3.结果3.1冬夏正常人体的褪黑素分泌并没有显著的差异,但还是能显示出一定的趋势,即无论是男生组、女生组还是男女合计组,其褪黑素分泌还是冬季稍高于夏季。3.2在生理条件下,冬夏季节的变化对下丘脑-垂体-甲状腺轴各水平激素均有显著的影响,除T4外,T3、TSH、TRH的在冬季的分泌量冬季明显高于夏季,两者间差异非常显著,P<0.01。3.3在生理条件下,冬夏季节的变化骨对形成指标也有显著的影响,其中,BALP和CICP在冬季的分泌量冬季明显高于夏季,两者间差异非常显著,P<0.01。3.4褪黑素、甲状腺轴和骨代谢具有密切的关系。研究表明,在冬至时,女生组血清MT与TRH呈正相关,相关系数为0.559,但MT与T3、T4、TSH的相关性并不显著。在骨代谢方面,夏至时,健康成年人女生组T4与BGP呈正相关,相关系数为0.524,p<0.05;女生组TRH与BGP呈正相关,相关系数为0.491,p<0.05;男生组TSH与BALP呈负相关,相关系数为-0.585,p<0.01;冬至时,女生组T3与BGP呈正相关,相关系数为0.524,p<0.05;男生组T3与CICP呈正相关,相关系数为0.547,p<0.05;男女合计组T3与BALP呈正相关,相关系数为0.714,p<0.01。4.结论4.1神经内分泌系统与自然协调共振的季节性变化,为《内经》“天人相应”理论的合理科学内涵提供实验依据。4.2证明“肾主骨”的生理功能的确存在一个季节性变化态势,骨形成的指标在冬季明显高于夏季,说明骨形成在冬季是比较旺盛的。4.3松果体和甲状腺轴在“肾应冬,主骨”的相关调控中发挥了重要作用,其过程可以概括为:冬季自然光照的减少促使松果腺褪黑激素分泌增多,同时温度等其他因素的变化也刺激了其他感受器,激发了神经内分泌系统,信号传递到体内下丘脑-垂体-甲状腺轴,使该轴激素分泌增加,进而调节骨代谢的变化,使冬季骨形成增加,实现了中医“肾应冬,主骨,主闭藏”的生理功能。