发酵饲料专用微生物的筛选研究

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随着国民经济的增长,人们对食品安全性的要求不断提高,同时对环境保护和饲料安全意识也不断增强,如何解决食品安全性问题,如何寻找和开发无毒副作用、无耐药性、无蓄积残留、无环境污染的产品,应该从源头做起,目前菌体蛋白饲料产品的研发是我国饲料工业发展极为迫切需求的,也是当今社会亟待解决的问题,因此推广微生物技术的应用对于食品安全性具有重要意义。应用复合微生物发酵技术生产是对传统饲料生产模式的一种变革,同时也是现代微生物技术应用于传统生产的一种标志,当前允许应用于生产的饲用级微生物主要以芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、光合细菌等四大类为主。综合查阅发现芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌之间具有协同互补作用并具有优良抗逆性状、耐高温、耐酸碱性、耐挤压性易贮存等独特的生物特性成为研究热点。本研究针对微生物发酵饲料现状和今后的发展趋势,以发酵食品作为微生物分离源,采用分离、鉴定并纯化的纯种乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌进行发酵饲料的制备研究,使之为后续规模化、工业化发酵饲料的生产奠定基础。本研究主要试验内容和结论如下:(1)从24份纳豆粉、鲜纳豆和豆豉中筛选出16株高产菌株,从20份酒曲中筛选出14株高产菌株,从20份腌制酸菜中筛选出14株高产菌株。(2)利用现代生物分析技术对上述三类菌株进行形态学和生理生化鉴定,鉴定结果表明,上述三类高产菌株分别为:N1-N16为纳豆芽孢杆菌、Z1-Z14为植物乳酸杆菌、J1-J7、J9为酿酒酵母J8、J10-J14为产朊假丝酵母。(3)将经过鉴定的菌株,通过淀粉水解和酪蛋白水解培养基初筛得到44株菌株进行淀粉酶及蛋白酶活性测定,将筛选出的最佳高产淀粉酶和蛋白酶菌株N8、Z14、J9、J14定为出发菌株,并对其生长特性进行研究,研究结果表明:N8菌株在0h-8h为迟缓期;8h-20h为对数期;20h-24h为稳定期,24h后达到衰亡期;Z14菌株在0h-2h为迟缓期,2h-14h为对数期,14h-24h为稳定期,24h后达到衰亡期;J9菌株在0h-6h为迟缓期,6h-20h为对数期,20h-30h为稳定期,30h后达到衰亡期;J14菌株在0h-8h为迟缓期,在8h-20h为对数期,20h-24h为稳定期,24h后达到期。从四菌株比较看,确定培养20h是菌种采样留菌株的最好时期。(4)经拮抗试验确定出发菌株纳豆芽孢杆菌、植物乳杆菌、酿酒酵母、产朊假丝酵母四株菌之间无抗性及抑制反应,适合进行下步固态发酵试验。(5)以蛋白含量、残渣重量为筛选指标,将未接种菌株、单一菌株与复合菌株的饲料样品进行比较,发现N8、Z14、J9、J14四株菌之间有较好的协同作用,初步筛选出用于发酵饲料最佳的纯种复合菌,为后续的研发与利用奠定了基础。
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