目的：本实验以慢性病毒性肝炎患者肝组织和血清的转化生长因子β₁（transforming growth factor β₁，TGF-β₁）为研究对象，观察肝纤维化不同阶段TGF-β₁在肝组织内表达情况及血清水平，探讨TGF-β₁与肝纤维化发生发展及炎症损伤的关系，比较肝脏、血清TGF-β₁及常用血清纤维化标志物（PCⅢ、HA、LN、CⅣ）在反映肝纤维化情况方面的优劣，为TGF-β₁作为反映肝纤维化的指标提供理论依据，并提示可以针对阻断TGF-β₁开展抗纤维化治疗的研究。方法：随机选取92例慢性病毒性肝炎患者，其中男性78例，女性14例，年龄16～79岁（37.8±16.3岁）。按照2000年全国第十次病毒性肝炎及肝病学术会议修订的《病毒性肝炎防治方案》的诊断标准，其中慢性肝炎轻度23例，慢性肝炎中度26例，慢性肝炎重度18例，肝硬化25例。病原学诊断：乙型肝炎88例，丙型肝炎3例，乙丙重叠感染1例。92例病人中的31例于入院后做肝穿刺组织活检，标本长度均在1cm以上，即刻用10%中性甲醛固定，24小时后石蜡包埋保存。肝穿前后2日内抽取空腹不抗凝静脉血，待血块凝缩后，以3000转/分速度离心10分钟，取血清置于－20℃冰箱保存。除肝穿者外，其余61例病人只于入院后2日内抽取空腹不抗凝静脉血，分离留取血清标本，－20℃冰箱中保存。肝组织标本进行常规HE染色，胶<WP=4>原纤维染色（Masson三重染色），及TGF-β₁的免疫组织化学染色，并应用JVCKY-F30B 3-CCD摄像头采集图像，北京航空航天工业大学CM-2000B型多媒体真彩色图文分析系统对肝脏TGF-β₁和胶原进行图像分析定量。血清标本用酶联免疫法检测TGF-β₁的血清水平，同时，用放射免疫法检测PCⅢ、HA、LN、CⅣ四项常用纤维化标志物，用日本Olympus2700全自动生化分析仪检测肝功能，用美国ACL全自动血凝功能检测仪检测凝血酶原活动度（PTA）。统计学处理采用SPSS10.0版统计软件。结果：（1）肝组织TGF-β₁免疫组化染色观察结果及图文分析结果：TGF-β₁染色阳性物质呈棕黄色。S0期未见明显阳性物质，S1、S2期阳性物质主要分布在肝窦壁及窦周细胞、坏死灶及汇管区，着色较浅，S3期、S4期在纤维间隔和肝细胞中均有分布，且着色深，S4期肝细胞内可见大量染色阳性物质。按肝组织纤维化程度期别分组，总体来看，从S0组到S4组，TGF-β₁的面密度逐渐增加，S1组、S2组、S3组、S4组与S0组比较，S3组与S1组、S2组比较，S4组与S1组、S2组、S3组比较，TGF-β₁面密度之间的差异均具有显著性（P<0.05），而S2组与S1组之间比较则无显著性差异（P> 0.05）。按炎症活动度级别分组，G1组、G2组、G3组、G4组的肝组织TGF-β₁面密度较G0组明显增加，其差异均具有显著性（P< 0.05），而G1组、G2组、G3组、G4组之间两两比较则无显著性差异（P> 0.05） 。结果表明肝脏TGF-β₁水平与纤维化程度密切相关，随纤维化程度加重而表达增多，与炎症活动度则无固定关系，但无炎症存在时TGF-β₁不会高水平表达。<WP=5>（2）肝组织胶原图像分析结果：按肝组织纤维化程度期别分组，总体来看，从S0组到S4组，胶原的面密度逐渐增加，S1组、S2组、S3组、S4组与S0组比较，S3组与S1组比较，S4组与S1组、S2组、S3组比较，胶原面密度之间的差异均具有显著性（P< 0.05）,S2组与S1组，S3组与S2组之间比较差异不具有显著性（P＞0.05）。按炎症活动度级别分组，G1组、G2组、G3组、G4组肝组织胶原面密度较G0组均增加，差异具有显著性（P< 0.05），而G1组到G4组各组间比较则无显著性差别（P＞0.05）（见表2） 。结果表明肝组织胶原含量随纤维化程度加重而增加，与炎症活动度级别关系不密切，但无炎症时，胶原合成不会增加。（3） 肝组织TGF-β₁水平与血清TGF-β₁浓度呈正相关，相关系数为0.896（P< 0.01）,表明血液中的TGF-β₁浓度能较好的反映肝脏的TGF-β₁表达水平。肝组织TGF-β₁水平与肝组织胶原含量呈正相关,相关系数为0.863（P< 0.01），血清TGF-β₁浓度与肝组织胶原含量也呈正相关，相关系数为0.667（P< 0.01）。肝组织TGF-β₁水平与血清PCⅢ、HA、LN、CⅣ之间均呈正相关,相关系数分别为0.824、0.720、0.747、0.839（P值均< 0.01），血清TGF-β₁与PCⅢ、HA、LN、CⅣ亦均呈正相关，相关系数分别为0.765、0.631、0.594、0.722（P值均< 0.01）。肝组织胶原含量与血清纤维化标志物PCⅢ、HA、LN、CⅣ之间均呈正相关, 相关系数分别为0.635、0.783、0.742、0.591（P值均< 0.01）。<WP=6>（4） 血清TGF-β₁与谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）之间无相关性（P>0.05），与 白蛋白（ALB）、胆碱酯酶（ChE）、凝血酶原活动度（PTA）均呈负相关，相关系数分别为―0.739、―0.766、―0.658（P值均< 0.01），与总胆红素成较弱的正相关，相关系数为0.424 （P< 0.01）。结论：（1）通过肝组织TGF-β₁免疫组化染色，观察到在肝纤维化早期或轻度纤维化时, TGF-β₁主要来源于肝间质细胞，纤维化后期，肝实质细胞也大量表达TGF-β₁。 （2）肝脏TGF-β₁的表达在肝纤维化的启动阶段需要炎症刺激，但肝纤维化进展到一定阶段后，TGF-β₁与活化的HSC之间形成自分泌环路，促使肝纤维化自行延续，不?