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黄精是传统药食两用中药,具有补肾益精、滋阴润燥的功效,主要用于治疗体虚乏力、心悸气短、肺燥干咳、糖尿病等。黄精中的主要活性物质为黄精多糖。本文以人工种植的滇黄精Polygonatum kingianum为研究对象,对其主要成分黄精多糖的制备与含量测定方法进行研究,为其质量分析和深入开发应用提供科学参考。已完成的主要研究成果如下:(1)采用水提和分级醇沉法,从滇黄精中获得三个多糖级分(PK-F1～PK-F3)。采用Toyopearl DEAE-650M弱阴离子交换色谱法进一步分离PK-F1组分,从0.5 mol/LNaCl洗脱流分中纯化获得多糖级分PK-P1。这些制备的多糖样品用于后续质量分析。(2)采用高效分子排阻色谱-示差检测法,以葡聚糖为对照品,建立了黄精多糖相对重均分子量(Mw)测定方法。色谱条件:采用LC-20A液相系统,ShodexRI-101检测器,TSK-gelG3000PWxL(300mm×7.8mm,10μm)色谱柱,流动相为纯水,流速0.5 ml/min,柱温,30 ℃,进样量20μL。测得葡聚糖回归方程为:lgMw =-0.3409tR+ 8.7708(R2 = 0.9974),线性范围0.18～200 kD,准确度、精密度、重复性和稳定性等其它实验结果符合方法学要求。测定PK-F1～PK-F3三个样品中多糖主峰的相对分子量Mw依次为149.4、40.3、1.47-3.76kD。其中,分子量149.4kD的黄精多糖为本文首次报道。(3)采用间羟基联苯显色法,首次建立了滇黄精多糖中的糖醛酸含量测定方法,半乳糖醛酸回归方程为 y = 0.0072x-0.0674(R2=0.9982),线性范围 10.02-60.12μg/ml,准确度、精密度、稳定性、重复性和加样回收率等方法学实验结果符合要求。测定PK-F1～PK-F3三个样品的糖醛酸含量(以半乳糖醛酸计)依次为28.3%、16.2%、4.93%。黄精多糖中的糖醛酸含量为本文首次报道。(4)采用2015版中国药典规定的蒽酮-硫酸显色法,建立了滇黄精多糖中的中性糖含量测定方法。葡萄糖回归方程y = 0.0096x-0.1021(R2=0.9984),线性范围10.03-80.24μg/ml,准确度、精密度、稳定性、重复性和加样回收率等方法学实验结果符合要求。测定PK-F1～PK-F3三个样品的中性总糖含量(以葡萄糖计)依次为78.0%、66.9%、64.5%。