目的研究制备具有成骨活性的仿生性骨膜,植入骨缺损区修复骨缺损,为解决骨缺损修复提供新的思路,进而为临床的实际应用,最终代替自体骨及异体骨移植修复骨缺损提供实验依据。方法应用组织工程的技术方法,以组织学、免疫组织化学与动物实验学相结合的方法进行实验研究。选定脂肪干细胞(ADSCs)作为种子细胞,体外成骨诱导为成骨细胞,对其生物学特性进行检测,通过细胞的形态学、碱性磷酸酶活性、茜素红染色、von Kossa染色等技术指标鉴定其向成骨方向分化。将成骨诱导的脂肪干细胞与作为支架材料的小肠粘膜下层(SIS)在体外复合培养构建出具有功能的细胞-材料复合体,制成仿生性骨膜,植入裸鼠皮下,通过组织学、透射电镜、免疫组织化学观察成骨情况及两者的细胞相容性。最后建立节段性骨缺损动物模型,将仿生性骨膜植入骨缺损区修复骨缺损,通过X线摄片、组织形态学检测等方法鉴定其成骨机制与自体骨膜移植成骨的相似性,确定仿生骨膜修复骨缺损的效果。结果体外分离培养扩增兔脂肪干细胞,经成骨诱导后可表达成骨细胞表型。成骨诱导的脂肪干细胞与SIS复合培养可构建出具有生理骨膜结构和功能的仿生骨膜,植入裸鼠体内可形成具有良好血运的新生骨组织。仿生骨膜修复兔节段性骨缺损效果良好,其成骨机制与自体骨膜移植成骨类似。结论兔脂肪干细胞体外成骨诱导培养可转化为成骨细胞,可表达成骨细胞表型,为脂肪干细胞作为骨组织工程的种子细胞提供实验依据。SIS与脂肪干细胞构建的仿生骨膜在动物实验的效果,确定了SIS作为支架材料为组织工程骨的新陈代谢提供了良好的环境,说明两者具有良好的细胞生物相容性。仿生骨膜可修复兔长段骨缺损的实验研究,使组织工程骨膜移植有望成为修复大段骨缺损的有效手段。意义近年来,组织工程技术的迅速发展使现代医学走出了组织、器官移植的范畴,进入了组织、器官再造的新时代。骨缺损是骨科临床上常见的疾病,骨缺损的修复也是临床治疗的难题之一。利用骨组织工程学技术制造仿生性骨膜,为解决骨缺损修复这个难题提供新的思路,寄希望利用患者自身的脂肪干细胞与SIS构建仿生骨膜,应用于临床骨缺损、骨不连的治疗,为骨缺损的修复治疗带来创新性的变革。