桦褐孔菌中多糖类和甾体类化合物的构效关系研究

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为探索桦褐孔菌(Inonotus obliquus (Fr.) Pilat)中主要有效成分多糖和甾体类化合物的构效关系,本文采用乙醇回流提取、梯度萃取得到桦褐孔菌的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水提取物。利用色谱等分离方法和不同鉴定方法对桦褐孔菌石油醚层和乙酸乙酯层萃取物所含的化学成分进行了分离和鉴定。从中分离得到9个化合物,并对其中6个主要化合物进行了鉴定,包括羊毛甾醇(1),麦角甾醇(2),桦褐孔菌醇(3),过氧麦角甾醇(4),栓菌酸(5)和3-acetyloxylanosta-8,24-diene-21-ol(6)。选择小鼠巨噬细胞RAW264.7为体外细胞抗炎模型,从而追踪主要有效化合物并揭示化合物的抗炎活性与结构之间的关系;选择两种体外抗癌模型测试不同极性萃取物和所得化合物的抗癌活性,从而追踪主要有效化合物并揭示化合物的抗癌活性与结构之间的关系。结果显示,石油醚层和乙酸乙酯层都对前列腺癌细胞PC3和乳腺癌细胞MDA-MB-231表现出良好的抑制活性,除了羊毛甾醇(1)和桦褐孔菌醇(3)外,其余四个化合物也都表现出了一定的抑制癌细胞的活性。所有不同极性的萃取物和所得化合物都对NO有一定的抑制活性;除了正丁醇层、水层、羊毛甾醇(1)、和桦褐孔菌醇(3)外,都表现出了一定的抑制NF-κB的活性。另外,采用DEAE-52纤维素阴离子交换柱色谱对IOPS进行纯化,选用0.1M NaCl溶液洗脱下来的组分(IOPS-2)作为本实验的研究对象。采用不同方法对IOPS-2进行结构修饰。对其修饰前后的表观特征、构象、分子量和单糖组成变化进行了研究。选择了三种体外模型对修饰前后的多糖进行了抗氧化作用的研究,从而揭示了桦褐孔菌多糖的构效关系。结果显示,物理和化学修饰都造成了桦褐孔菌多糖在表观特征、构象、分子量和单糖组成上的变化;热处理、超声处理和乙酰化的多糖的抗氧化活性都有不同程度的提高。综上所述,桦褐孔菌中的甾体类化合物在抑制癌细胞中起到了一定的作用,同时起到一定的抗炎作用。对于修饰后桦褐孔菌多糖,可能由于在多糖结构、分子量、构象和单糖组成上的变化,使得修饰后的多糖抗氧化活性有所提高。因此,本研究结果为桦褐孔菌生物活性成分的深入研究奠定了一定的基础。
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