目的：通过检测行体外受精-胚胎移植的多囊卵巢综合征患者（polycystic ovary syndrome PCOS）及正常月经周期患者卵巢颗粒细胞上血管紧张素II受体1（AT1）、血管紧张素II受体2（AT2）、血管紧张素1-7受体（MAS）表达的差异，探讨其是否参与PCOS发病；通过使用不同浓度的AngII、Ang1-7作用于卵巢颗粒细胞，了解其对颗粒细胞增殖分泌功能的影响，探讨其在局部卵巢组织中的生理病理作用。方法：1人卵巢黄素化颗粒细胞收集取自2011年11月--2012年6月在河北医科大学第二医院生殖医学中心行体外受精-胚胎移植（IVF-ET）的卵泡穿刺术患者21例，年龄24～38岁。患者均为长周期促排卵方案者，定期监测卵泡发育，当优势卵泡直径>17mm时，肌肉注射10000IUhCG，于注射34-36h后，B超下经阴道穿刺卵泡采集卵母细胞，同时收集卵泡液。对照组为因输卵管不通或者因男方因素不孕的女性11例，这些患者平素月经规则，排卵功能及盆腔超声检查无异常，均排除其他的内分泌疾病，行IVF-ET前3个月内无激素类药物应用史，无心、肝、肾等疾病病史；实验组为多囊卵巢综合征患者10例，PCOS的诊断参照2003年鹿特丹标准[1]：①稀发排卵或不排卵；②高雄激素血症表现；③卵巢多囊样改变（一侧或双侧卵巢直径2-9mm的卵泡≥12个，或（和）卵巢体积≥10ml），以上三项中具备两项即可诊断。同时排除肾上腺或垂体等其他内分泌疾病，且患者近3个月内无激素类药物应用史，无心、肝、肾疾病史。2体外培养正常月经周期及PCOS患者卵巢黄素化颗粒细胞72小时，RT-PCR检测颗粒细胞AT1、AT2、MASmRNA水平的表达；3以10^-10～10^-5mmol/L浓度的AngII、Ang1-7作用于人卵巢黄素化颗粒细胞24、48、27小时，四甲基偶氮唑蓝法（MTT）法测OD值，检测AngII、Ang1-7对颗粒细胞增殖功能的影响；4以10^-6mmol/L浓度的AngII、Ang1-7作用于人卵巢黄素化颗粒细胞24、48、72小时，化学发光法检测颗粒细胞上清液中雌激素（E2）、孕激素（P）的浓度，间接了解AngII、Ang1-7对颗粒细胞功能的影响。结果：1人卵巢黄素化颗粒细胞体外生长情况：细胞成活率达90%以上。细胞培养24h内贴壁、增殖；培养2d后明显增殖，2-5d时处于分裂高峰；6-7d逐渐变形、退化。培养第3d经HE染色可见细胞核大、圆，细胞质透光性好、富含颗粒及空泡，核染深蓝色，细胞质呈淡红色。2RT-PCR法检测AT1、AT2、MASmRNA的结果2.1AT1mRNA的表达正常月经周期患者卵巢黄素化颗粒细胞与PCOS患者卵巢黄素化颗粒细胞中均有AT1mRNA表达，AT1mRNA表达的结果分别为2.895±0.9625、5.266701±1.7663，PCOS患者组AT1mRNA明显高于正常月经周期组，且差异有统计学意义（P<0.05）。2.2AT2mRNA的表达正常月经周期患者卵巢黄素化颗粒细胞与PCOS患者卵巢黄素化颗粒细胞中均有AT2mRNA表达，AT1mRNA表达的结果分别为1.8662±0.669、5.9741±2.1063，PCOS患者组AT2mRNA明显高于正常月经周期组，且差异有统计学意义（P<0.05）。2.3MASmRNA的表达正常月经周期患者卵巢黄素化颗粒细胞与PCOS患者卵巢黄素化颗粒细胞中均有MASmRNA表达，MASmRNA表达的结果分别为0.5337±0.1974、1.4830±0.2593，PCOS患者组MASmRNA明显高于正常月经周期组，且差异有统计学意义（P<0.05）。3MTT检测结果3.1AngII作用于颗粒细胞后MTT检测结果10^-10～10^-5mmol/L的AngII作用24、48、72小时，其吸光度（OD）均较对照组低，且差异有统计学意义（P<0.05）10^-9～10^-6mmol/L浓度组随着浓度的增加AngII抑制细胞增殖的作用逐渐增强，以10^-6mmol/L时抑制作用最强；3.2Ang1-7作用于颗粒细胞后MTT检测结果：10^-10～10^-5mmol/L的Ang1-7作用于颗粒细胞24、48、72小时，OD值均较对照组低，且差异有统计学意义（P<0.05）；10^-9～10^-6mmol/L浓度组随着浓度的增加Ang1-7抑制细胞增殖的作用逐渐增强，以10^-6mmol/L时抑制作用最强；3.3随时间延长MTT检测结果随AngII、Ang1-7作用时间延长（24、48、72小时），OD值逐渐增加，且差异有统计学意义（P<0.05）；4AngII、Ang1-7作用于颗粒细胞后上清液E2、P浓度：4.1与对照组相比，AngII、Ang1-7组作用24、48、72小时后，颗粒细胞上清液中E2浓度增加，且差异有统计学意义（P<0.05）。两药物间E2浓度无明显差异（P>0.05）；4.2与对照组相比，AngII、Ang1-7组作用24、48、72小时后，颗粒细胞上清液中P浓度无明显变化（P>0.05）。两药物间P浓度也无明显差异（P>0.05）；4.3随作用时间延长（24、48、72小时），各组E2、P均增加，且差异有统计学意义（P<0.05）。结论：1密度梯度离心法体外培养人卵巢颗粒细胞成活率较高；2PCOS患者卵巢黄素化颗粒细胞上AT1、AT2、MAS的分子表达更强，其可能参与了PCOS的病理过程；3生理剂量的AngII(10^-10mmol/L)抑制细胞生长，且随浓度的增加抑制作用逐渐增强，10^-6mmol/L浓度时抑制作用最强；生理剂量的Ang1-7抑制细胞生长，且随浓度的增加抑制作用逐渐增强，10^-6mmol/L浓度时抑制作用最强；随药物作用细胞时间增加（24、48、72小时）细胞逐渐增殖；4AngII、Ang1-7促进卵巢黄素化颗粒细胞雌激素的分泌，但对孕激素无明显影响；随作用时间延长（24、48、72小时）颗粒细胞分泌的雌孕激素水平逐渐增加。