论文部分内容阅读
目的 探讨通过应用脂质体Lipofectamine 2000作为载体将叉头框转录因子M1(FoxM1)的siRNA转入人甲状腺乳头状癌细胞株K1中,将叉头框转录因子M1(FoxM1)沉默掉,观察对人甲状腺乳头状癌细胞株的增殖、迁徙、侵袭的影响。方法 规范化培养甲状腺乳头状癌细胞株K1,待细胞长至对数期时严格按照siRNAFoxM1的使用说明进行操作,用免疫印迹试验检测FoxM1-siRNA在人甲状腺癌细胞K1中表达情况;用脂质体lip-2000分别将FoxM1-siRNA以及control siRNA转入人甲状腺癌K1细胞株中,分别记作转染组以及无意义序列组,另取一株K1细胞添加PBS溶液记作空白对照组;之后使用MTT的方法检测分组后每组细胞的生长的状况,也就是增殖的能力;利用单层细胞划痕试验检测分组后的每组细胞迁徙的能力;利用Transwell的侵袭实验部分检测分组后每组细胞侵袭的能力。结果 1荧光siRNA通过脂质体Lipofectamine 2000转染至K1细胞48h后,荧光显微镜下观察转染入siRNA的细胞数与总细胞数的比值即为转染效率,三次实验都证明转染效率能到达80%以上。2免疫印迹试验结果表明FoxM1-siRNA使FoxM1蛋白表达下调。3 MTT实验结果显示:在24h、48h、72h这三个时间节点上,转染组细胞的增殖能力对比空白对照组明显受到抑制,差异具有统计学意义(P<0.05)。4单层细胞划痕损伤修复实验表明:转染组细胞迁徙能力弱于无意义序列组与空白对照组(P<0.05)。5 Transwell小室侵袭实验表明:转染组的细胞对比其余两组,能穿过小室的基质膜,到达了小室背面的细胞,数量相对减少明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 1将siRNA-FoxM1转染至K1细胞株后,K1的凋亡水平明显提高,其增殖、迁徙及侵袭能力下降。2 FoxM1在今后的临床试验以及治疗中,有成为新的靶向治疗的靶点的潜力。