党参多糖的分离纯化、理化性质与生物活性研究

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多糖是党参中的主要成分之一,有多种生物活性。目前药理活性实验所用多糖多为粗品,结构性质并不明确。国内外对党参多糖的分离纯化、理化性质、构效关系等方面的研究很少。本文对党参多糖的提取条件、理化性质及其抗氧化、抗疲劳、对神经干细胞硫代硫酸钠和谷氨酸损伤的保护作用、神经营养等生物活性进行了较为系统的探讨,主要结果如下:1、党参多糖的提取条件、纯度鉴定及性质通过正交实验确定党参多糖的最佳提取条件为:85-95℃水提,每次1h,提取3次,样液比为1:20。党参在脱脂、脱单糖及低聚糖后,正交实验条件提取多糖,乙醇沉淀。干燥后用DEAE-纤维素(OH)柱层析,阶段洗脱后得到党参多糖(CPP)的六个部分,分别命名为CPP-1、CPP-2、CPP-3、CPP-4、CPP-5、CPP-6。各部分得率(占粗品%)为58.7,6.33,1.33,6.0,6.67,5.33。CPP-1再经Sepharose CL-6B凝胶柱层析后,得到CPP-1-1。采用SepharoseCL-6B凝胶柱层析法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法,证实CPP-1-1为分子量分布均一的多糖。紫外光谱中CPP-1-1在260nm,280nm处无特征吸收峰,表明不含蛋白质、核酸;红外光谱显示CPP-1-1具有多糖的特征吸收峰。CPP-1-1水解后,气相色谱测定其糖醇乙酸酯衍生物,结果表明CPP-1-1中含有阿拉伯糖、木糖、半乳糖和未知糖,它们的摩尔比为:1:1.6:1.2:2.9。采用硫酸-咔唑法测定CPP-1-1中糖醛酸含量为3.54%。2、党参多糖的生物活性采用超氧阴离子自由基体系、羟基自由基体系,测定CPP和CPP-1-1清除自由基的性能,结果表明二者对这两种自由基无清除作用。神经营养活性实验表明CPP-1-1没有神经营养活性。抗疲劳实验表明,CPP-1-1能明显增强小鼠常压耐缺氧能力:能提高小鼠体内肌糖元和肝糖元的储备量,提高运动前后乳酸脱氢酶活力,降低运动后血清尿素氮的增量,加速体内血清尿素氮的清除速率。CPP-1-1能明显减少硫代硫酸钠、谷氨酸对神经干细胞的损伤。对神经干细胞硫代硫酸钠和谷氨酸损伤有保护作用。
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