发酵木糖产酒精酵母菌的分离、筛选及优化研究

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本试验对发酵木糖产酒精酵母菌的分离、筛选、优化及发酵条件的优化进行了研究,本研究主要包括以下四方面的内容:1发酵木糖产酒精酵母菌的分离、筛选及鉴定本试验将稻草腐烂物、腐败的玉米秸秆及玉米土壤分别经含木糖的培养液增菌后,采用稀释平板法分离纯化出酵母菌。然后将分离、纯化所得的酵母菌株逐株进行不同浓度的木糖发酵液的培养,视其产酒与否、产酒速度、酒精度的高低、产酒率等指标综合评定选取优良菌株。本试验筛选出了3株优良菌株,菌号分别为104号、108号、113号。然后通过观察其个体形态特征、菌落培养特征及生理生化试验结果对其进行鉴定。鉴定结果为该3株菌株均为产朊假丝酵母(Candida utilis)。2发酵木糖产酒精酵母菌的优化将所选优良菌株108号先进行紫外线诱变处理,并通过对影响紫外诱变因素的试验,得出较优紫外诱变条件为:合适诱变功率为25W;适宜诱变时间为8min;较佳菌悬液浓度为10~8个/mL。然后将紫外诱变后的菌株进行木糖发酵筛选,将筛选出的较优菌株进一步亚硝酸钠诱变、紫外与亚硝酸钠复合诱变及原生质融合试验,最终选取发酵木糖能力最强的菌株。3发酵木糖产酒精条件的优化通过对发酵的时间、温度、摇瓶转速、通气量等因素的选择来确定较优发酵条件。本试验得出酵母菌发酵木糖产酒精的适宜条件为:用容积为300mL的三角瓶装发酵液150mL即为最适通气量;温度为25℃;摇瓶转速为100r/min;pH 5.5;培养时间为5d;用硫酸氨作为适宜氮源。4研究了如何提高酵母菌原生质体形成率的关键技术通过对超声波时间、蜗牛酶浓度、处理温度等因素的试验来选择较优酵母菌原生质体形成条件,探索出了制备酵母菌原生质体较理想条件为:超声波(功率为100%)和蜗牛酶(浓度为2.5%)同时处理酵母菌,时间为4h。
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